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微管去稳蛋白2文献资料
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海兰褐鸡卵泡颗粒细胞微管去稳蛋白2过表达对Ras-MAPK信号通路的影响
目的 探讨微管去稳蛋白2(stathmin-2-like protein,STMN2)过表达对海兰褐鸡卵泡颗粒细胞中Ras-MAPK(mitogen-activated protein kinase)信号通路的影响.方法 将STMN2腺病毒过表达载体以MOI为350 pfu/cell转染原代培养的蛋鸡卵泡颗粒细胞模型,设培养液组和腺病毒空载体组为对照组,转染48 h后,收集细胞总RNA和总蛋白,荧光定量PCR法检测各组细胞STMN2 mRNA水平及STMN2过表达对颗粒细胞分泌的细胞外调节蛋白激酶1(extracellular regulated protein kinases1,erk1)、erk2、大鼠肉瘤蛋白(rat sarcoma,ras)和转录激活因子ETS样蛋白1(ets-like protein l,elk-1)的影响,Western blot法检测各组STMN2蛋白水平及STMN2过表达对颗粒细胞分泌的erk 1、erk2、磷酸化erk1(p-erk1)、p-erk2 、ras和elk-1的影响.结果 与培养液组和腺病毒空载体组比较,STMN2过表达载体组STMN2 mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P＜0.01);除elk-1蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05)和elk-1 mRNA水平显著增加(P＜0.05)外,STMN2过表达使颗粒细胞分泌的目的基因mRNA与蛋白表达水平均极显著增加(P＜0.01).结论 STMN2可通过Ras-MAPK信号通路影响蛋鸡卵泡颗粒细胞周期.
关键词： 微管去稳蛋白2 Ras-MAPK信号通路 海兰褐鸡 卵泡颗粒细胞 过表达
