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ESAT-6重组二聚体文献资料
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结核分枝杆菌ESAT-6重组二聚体的表达、纯化及其在血清学诊断中的初步应用
目的 表达和纯化结核分枝杆菌早期分泌蛋白ESAT-6重组二聚体(rdESAT-6),并探讨其在结核病血清学诊断中的价值.方法 以HG856A核酸疫苗质粒为模板,经PCR扩增获得2xesat-6基因,克隆至pET-28a质粒,构建原核表达质粒pET2E6;转化大肠杆菌BL21(DE3).IPTG诱导表达;用Ni2+柱亲和层析纯化重组蛋白,并用Western blot鉴定其反应原性,ELISA检测其敏感性和特异性.结果 ESAT-6重组二聚体以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的35%;纯化的rdESAT-6纯度可达95%,可与ESAT-6小鼠抗血清发生特异性反应;用于结核病血清学诊断的敏感性为30%,特异性为95.8%.结论 已成功表达并纯化了rdESAT-6,可作为结核病血清学诊断或皮试检测用的抗原之一.
关键词： 结核分枝杆菌 ESAT-6重组二聚体 表达 纯化 血清学诊断
