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  • HIV-1 Vif与ElonginC蛋白在大肠杆菌中的共表达

    作者:朱可形;王小丹;杜娟;郭博;孔维;于湘晖

    目的 在大肠杆菌中共表达HIV.1Vif与ElonginC蛋白.方法 PCR扩增ElonginC基因全长DNA片段,克隆人pMDT-easy载体,经Nde I/BamH I双酶切后,与质粒pRSETB连接,构建质粒pRSETB-ElonginC.将质粒pMRI-Vif转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株,再将此菌株制备成感受态细胞.用pRSETB-ElonginC质粒转化该细胞,经1 mmol/L IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 质粒pRSETB-ElonginC经Nde I/BamH I双酶切,可切出约3 000和400 bp的2条片段,测序证明质粒构建正确.在大肠杆菌中共表达了Vif与ElonginC蛋白,该蛋白具有良好的抗原特异性.结论 在大肠杆菌中共表达了Vif与ElonginC蛋白.

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