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人BimS基因文献资料
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人BimS蛋白的原核表达及纯化
目的 克隆人BimS基因,原核表达并纯化目的 蛋白.方法 用PCR方法从HeLa细胞cDNA文库中扩增人BimS基因,克隆至pGEX-6P-1表达载体,转化大肠杆菌B121(DE3),IPTG诱导表达.表达产物经GST亲和层析纯化.结果 PCR扩增得到327 bp的DNA片段,重组表达质粒pGEX-6P-1-BimS经双酶切鉴定和测序分析,表明构建正确.表达的目的 蛋白相对分子质量约37 000,表达量约占菌体总蛋白的30%,纯化后纯度可达93%.结论 已成功克隆并原核表达了人Bim S基因,得到纯度较高的BimS蛋白,为进一步研究其结构和功能奠定了基础.
