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鱼蛋白胨的制备与质量分析
目的 制备鱼蛋白胨,并进行质量分析.方法 将鱼糜加工下脚料原料经绞碎、石油醚脱脂,得到鱼糜浆,用0.1％木瓜蛋白酶酶解,离心收集上清(即鱼水解蛋白胨溶液),经300 Da纳滤膜脱盐和浓缩,喷雾干燥后,获得淡黄色粉末,即鱼蛋白胨样品FZU01.对鱼蛋白胨FZU01和鱼粉蛋白的主要理化指标(澄明度、亚硝酸盐和碱性沉淀、酸碱度、含氮量、氨基氮、干燥失重、炽灼残渣)进行检测;在固定酵母提取物、NaCl浓度、初始pH和接种量的基础上,分别用两种蛋白胨配制LB培养基,接种大肠埃希菌,检测A600值;采用分子筛高效液相色谱法(size-exclusion high-performance liquid chromatography,SEC-HPLC)检测两种蛋白胨的相对分子质量.分别将50、150、300、600、900、1 200和1 500 mg/L组胺以及0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0和50.0 mg/L重金属离子(Hg2+、Cd2+、As3+、Cr6+和pb2+)加至大肠埃希菌中,37 ℃培养12h,检测A600值.结果 两种蛋白胨理化指标检测结果均符合《中国生物制品主要原辅材料质控标准》规定,酸碱度、含氮量、氨基氮、干燥失重和炽灼残渣之间差异无统计学意义(P＞0.05),鱼蛋白胨FZU01相对分子质量主要分布在1 000以内,占92.5％,鱼粉蛋白胨相对分子质量主要分布在10 000,小于1 000占56.1％;与鱼粉蛋白胨组相比,鱼蛋白胨FZU01组生长速率明显增加(P＜0.05).随着组胺浓度的增加,大肠埃希菌的生长抑制率逐渐增加,与组胺浓度呈正相关,IC50为257.3 mg/L,当组胺浓度大于600 mg/L时,完全抑制大肠埃希菌的生长;大肠埃希菌的生长抑制率与重金属离子浓度呈正相关,Hg2+、Cd2+、As3+、Cr6+和pb2+对大肠埃希菌的IC50分别为1.35、4.67、7.37、11.04和20.19 mg/L.结论 应增加蛋白质相对分子质量、组胺和重金属作为蛋白胨产品重要质量参数,控制一定的浓度限量范围,才能保证蛋白胨产品的稳定性和安全性.
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鱼蛋白胨和鱼油对替考拉宁产量和组分含量的影响
研究鱼蛋白胨和鱼油对替考拉宁产量和各组分含量的影响.通过在发酵培养基中选用不同原材%和21.0%.进而采用正交试验设#和鱼油能分别提高替考拉宁的产量15.8料,比较结果发现,鱼蛋白胨2#和0.8%鱼油可增加产%鱼蛋白胨2计,确定了佳发酵培养基配方.与对照组相比,在优化配方中添加0.5量达35%,效价高达3000u/ml以上,且产品中各组分的相对百分含量不发生明显改变.为探求其原理,分别对不同原材料进行氨基酸组分分析和碘值测定,分析结果推测鱼蛋白胨的作用与原料中含有较高量的替考拉宁生物合成氨基酸前体有关,而鱼油则通过提供饱和脂肪酸,参与替考拉宁起始氨基酸的生物合成.同时也证明了通过筛选含不同化学结构成份的发酵碳氮原材料,可定向控制替考拉宁的生物合成.
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一种新的鱼蛋白胨在产黄青霉生产青霉素中的应用
目的研究宁波海浦生物科技公司生产的鱼蛋白胨作为一种新型氮源对产黄青霉C-396生产青霉素的各环节的影响.方法在固体培养、发酵培养、生产米孢子制备时分别加入适量鱼蛋白胨,在相同条件下与原工艺配方对照比较,进行考察研究.结果采用该鱼蛋白胨用于产黄青霉C-396有利于提高生产种子的内在质量和发酵效价.结论海浦公司的鱼蛋白胨是一种较为理想的新型氮源.
