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  • 鸡白痢沙门菌减毒疫苗候选株冻存条件的优化及冻存菌株的遗传稳定性

    作者:耿士忠;刘欢;郭荣显;尹超;耿浩鹏;王耀楠;潘志明;焦新安

    目的 优化鸡白痢沙门菌减毒疫苗候选株冻存条件,并检测冻存菌株的遗传稳定性.方法 采用平板活菌计数方法检测添加不同保护剂(5%蔗糖水溶液、5%蔗糖脱脂乳液、5%蔗糖脱脂奶粉液、1.5%明胶水溶液),并于不同温度(常温、4℃、-20℃)及不同保存时间(常温冻存0、15和30 d,4及-20℃冻存0、30、60、90、120、210和540 d)条件下冻存的减毒疫苗候选株S06004△spiC的活菌数,确定佳冻存条件.检测经体内、外传代5、10、15、20代及原代减毒疫苗候选株S06004△spiC的生化特性,并对经体内、外传代20代及原代减毒疫苗候选株S06004△spiC进行PCR及测序鉴定.结果 佳冻存条件为:添加5%蔗糖脱脂奶粉溶液,于-20℃下冻存,保存时间至少可达1.5年.经体内、外传代后,减毒疫苗候选株S06004△spiC的生化特性与原代一致,其目的基因序列均未发生变化.结论 成功优化了鸡白痢沙门菌减毒疫苗候选株的冻存条件,该候选株具有良好的稳定性,为后期研究其安全性及免疫学特性奠定了基础.

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