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CD3-CD56+CD16+NK细胞文献资料
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不同细胞因子组合对人自然杀伤细胞体外高纯度扩增的实验研究
目的 探讨人自然杀伤细胞(NK)高效扩增培养技术,以获得一种优化的诱导扩增临床应用级别NK细胞的方法.方法 提取健康人外周血单个核细胞(PBMCs),应用免疫磁珠分选法(MACS)阴性分离出高纯度的CD3-CD56+ CD16+ NK细胞,采用X-VIVO培养基,在均含有白细胞介素(IL)-2、CD3单抗的基础上用不同的细胞因子组合对其进行体外扩增和诱导.采用细胞计数法、流式细胞术免疫表型分析比较NK细胞增殖后的数量与NK细胞纯度.结果 IL-7/IL-15/IL-21的优化组合刺激NK细胞增殖的效果为佳,培养18 d可使经免疫磁性珠阴性纯化的NK细胞扩增124倍,使未经纯化的PBMCs细胞增殖108倍.在NK细胞纯度方面,培养18 d可使经免疫磁性珠阴性纯化的NK细胞扩增后的CD3-CD16+ CD56+ NK细胞纯度达81.5％,CD3+ CD16+ CD56+ NK细胞阳性率为10.3％,NK细胞总纯度为91.8％;使未经纯化的PBMC细胞扩增后的CD3+CD16+ CD56+ NK细胞纯度达22.1％,CD3+CD16+CD56+NK细胞阳性率为33.5％,NK细胞总纯度为55.6％.而单用不同细胞因子IL-7、IL-15、IL-21对NK细胞扩增数量和纯度均有所不同.结论 采用X-VIVO培养基,在IL-2、CD3单抗的基础上加IL-7/IL-15/IL-21的优化组合刺激NK细胞增殖的数量和纯度达到佳效果,所产生的NK细胞质量可满足临床细胞免疫治疗抗肿瘤应用的需要.
