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肝癌组织中miR-338-3p的表达及与临床病理参数的关系
目的:探讨肝癌组织中微小RNA-338-3p(miR-338-3p)的表达及与临床病理参数的关系.方法:选取2015年1月至2016年6月我院手术获得的67例肝癌组织标本,同时每例标本均取癌旁正常组织标本作为配对对照,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)对两组组织标本中的miR-338-3p进行检测,并分析其与肝癌临床病理特征的关系.结果:45例(67.16％)miR-338-3p表达下调,22例(32.85％)表达上调;RT-qPCR结果显示,肝癌组织中miR-338-3p的相对含量为(0.76±0.38),低于癌旁正常组织中的(1.23±0.45),差异有统计学意义(t=-6.259,P=0.000).miR-338-3p在低分化、TNM分期Ⅲ+V期、肿瘤浸润深度T3+T4期、有淋巴结转移肝癌患者肝癌组织中的表达下调率高于中高分化、Ⅰ+Ⅱ期、T1+T2期、无淋巴结转移肝癌患者,差异有统计学意义(P＜0.05).不同性别、年龄、病理类型、肿瘤大小肝癌患者肝癌组织中miR-338-3p表达下调率差异无统计学意义(P＞0.05).结论:miR-338-3P在肝癌组织中呈低表达水平,与分化程度、TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关,可能参与了肝癌的发生发展过程,早期检测可作为评估肝癌病情的指标.
关键词： 肝癌 组织 miR-338-3p 病理参数 临床意义 -
胃癌病人血清miR-338-3p的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响
目的：研究胃癌病人血清miR-338-3p的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法：提取40例胃癌病人及37例健康志愿者血清总miRNA，采用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-338-3p的表达。基于生物信息学预测其功能，采用细胞转染、侵袭、增殖实验及流式细胞术、Western 印迹，研究其对胃癌细胞生物学行为的影响。结果：胃癌病人血清miR-338-3p表达显著低于健康志愿者（P<0.001）。体外实验证明，转染miR-338-3p后可明显抑制胃癌细胞株SGC7901和BGC823增殖（P<0.01）以及细胞侵袭能力，并促进其凋亡。同时抑制基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP）2蛋白的表达（P<0.05）。结论：胃癌病人血清miR-338-3p表达明显降低。 miR-338-3p具有抑制胃癌细胞增殖和侵袭、促进凋亡的作用。可能通过下调MMP2表达抑制胃癌细胞。
关键词： 胃癌 microRNA miR-338-3p -
miR-338-3p靶向TCF4对人肾癌细胞增殖、凋亡和转移的调节
目的 探究miR-338-3p靶向T细胞生长因子4(T cell factor,TCF4)对肾癌细胞及肿瘤生长的影响.方法 将肾癌细胞786-O分为4组:对照组、miR-338-3p mimic组、pc-TCF4组、miR-338-3p+TCF4组.qRT-PCR检测miR-338-3p及TCF4 mRNA水平.荧光素酶实验验证miR-338-3p与TCF4靶向关系.免疫印记检测细胞中TCF4、Ki67、cleaved caspase-3、 血管内皮细胞生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶2(MMP-2)的蛋白水平.CCK-8检测细胞增殖.流式细胞术检测细胞凋亡.Transwell检测细胞侵袭.划痕实验检测细胞迁移.免疫组化检测肿瘤组织中Ki67,cleaved caspase-3,VEGF及MMP-2的表达.结果 ①细胞转染miR-338-3p mimic后miR-338-3p表达升高,TCF4 mRNA水平下降,miR-338-3p与TCF4存在靶向关系.②miR-338-3p mimic可降低TCF4蛋白水平,pc-TCF4可提高TCF4蛋白水平,并减弱miR-338-3p mimic对TCF4的抑制作用.③miR-338-3p mimic可降低细胞增殖和Ki67蛋白水平,提高细胞凋亡及cleaved caspase-3蛋白水平.pc-TCF4可提高细胞增殖和Ki67蛋白水平,降低细胞凋亡及cleaved caspase-3蛋白水平,并减弱miR-338-3p mimic的抑增殖促凋亡作用.④miR-338-3p mimic可降低侵袭细胞数、 划痕愈合率及VEGF和MMP-2表达,pc-TCF4可升高侵袭细胞数、 划痕愈合率及VEGF和MMP-2表达,并减弱miR-338-3p mimic对侵袭迁移的抑制作用.⑤miR-338-3p mimic可增加荷瘤小鼠存活率及cleaved caspase-3蛋白水平,减小移植瘤体积及Ki67,VEGF和MMP-2的蛋白水平.pc-TCF4可减少荷瘤小鼠存活率及cleaved caspase-3蛋白水平,增大移植瘤体积及Ki67,VEGF和MMP-2的蛋白水平,并减弱miR-338-3p mimic对小鼠的保护作用.结论 miR-338-3p靶向TCF4可减弱肾癌细胞增殖、 侵袭及迁移并诱导凋亡,抑制肿瘤生长.
关键词： 肾癌 miR-338-3p 凋亡 侵袭 迁移 -
MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响
目的 构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响.方法 以pcDNATM 6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至E.Coli Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变.结果 测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖.结论 成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖.
关键词： miR-338-3p 胃癌 表达载体 细胞增殖
