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胚胎干细胞体外诱导分化
胚胎干细胞能在体外长期不断自我更新,具有高度分化潜能,可分化成胎儿和成体的几乎所有类型的细胞,如心肌细胞、神经细胞、上皮细胞、肝细胞、血细胞、胰岛细胞、脂肪细胞及生殖细胞等.在细胞治疗和组织器官替代治疗、发育生物学等的研究中将具有广阔的应用前景.目前已有多种胚胎干细胞体外定向诱导的报道.本文从体外诱导分化影响因素和几种主要诱导细胞类型进行分析和总结,为胚胎干细胞的诱导分化研究提供参考资料.
关键词: 胚胎干细胞(ESC) 诱导分化 -
小鼠胚胎干细胞体外诱导分化为精原干细胞的研究
目的:初步探讨在体外条件下诱导小鼠胚胎干细胞(EGFP-mESC)分化为精原干细胞(SSC)的条件,建立有效的技术平台.方法:采用部分模拟胚胎早期发育的方法,将EGFP-mESC(XV)经体外悬滴培养,制备拟胚体(EB);使用免疫磁珠分选法从EB中分离出表达原始生殖细胞(PGC)表面标志SSEA-1的细胞;获得的细胞经2 μmol/L维甲酸(RA)诱导增殖,使之向雄性生殖细胞分化.对诱导的细胞采用RT-PCR及免疫荧光检测特异性基因及蛋白的碱性磷酸酶.结果:在诱导EGFP-mESC向雄性生殖细胞分化的过程中,采用RT-PCR方法检测到了雄性生殖细胞特异表达基因Sry、fragilis、stella、Tex14等mRNA的表达:利用激光共聚焦方法检测到SSC表面标志蛋白Stra8、integrin-α6及Hsp90a的表达.结论:采用RA体外诱导EGFP-mESC定向分化为SSC是可行的.
关键词: 胚胎干细胞(ESC) 拟胚体(EB) 精原干细胞(SSC) 体外培养 诱导分化