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精原干细胞(SSC)文献资料
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小鼠胚胎干细胞体外诱导分化为精原干细胞的研究
目的:初步探讨在体外条件下诱导小鼠胚胎干细胞(EGFP-mESC)分化为精原干细胞(SSC)的条件,建立有效的技术平台.方法:采用部分模拟胚胎早期发育的方法,将EGFP-mESC(XV)经体外悬滴培养,制备拟胚体(EB);使用免疫磁珠分选法从EB中分离出表达原始生殖细胞(PGC)表面标志SSEA-1的细胞;获得的细胞经2 μmol/L维甲酸(RA)诱导增殖,使之向雄性生殖细胞分化.对诱导的细胞采用RT-PCR及免疫荧光检测特异性基因及蛋白的碱性磷酸酶.结果:在诱导EGFP-mESC向雄性生殖细胞分化的过程中,采用RT-PCR方法检测到了雄性生殖细胞特异表达基因Sry、fragilis、stella、Tex14等mRNA的表达:利用激光共聚焦方法检测到SSC表面标志蛋白Stra8、integrin-α6及Hsp90a的表达.结论:采用RA体外诱导EGFP-mESC定向分化为SSC是可行的.
关键词: 胚胎干细胞(ESC) 拟胚体(EB) 精原干细胞(SSC) 体外培养 诱导分化