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人静脉移植物基质金属蛋白酶-2和波型蛋白的表达
目的:探讨人静脉移植物基质金属蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)和波型蛋白(Vimentin)的表达情况.方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中MMP-2、Vimentin的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用Silicon Graphics Octane进行处理.结果:在正常静脉血管,有少量MMP-2的表达;Vimentin的表达较弱.在静脉移植的血管,MMP-2的表达显著增加,是正常血管的3.5倍;Vimentin(波形蛋白)在中膜和内膜的表达明显增多.另外,统计分析表明MMP-2在新内膜的表达均显著高于在中膜的表达(P＜0.01).结论:在静脉移植物的新内膜,MMP-2和Vimentin的表达均上调,提示这些重要分子在新内膜的形成和静脉再狭窄的病理过程中具有重要的作用.
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静脉移植物巨噬细胞浸润途径的实验研究
目的:探讨外膜是否是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径.方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用Silicon Graphics Octane进行处理,并对CD68阳性细胞进行计数.结果:在正常静脉血管,外膜中有少量CD68阳性细胞,中膜和内膜中少见;在病变的血管中,CD68免疫阳性细胞在外膜、中膜和内膜都可观察到,与正常血管相比差异有统计学意义(P<0.05),且有从外膜向中膜和内膜迁移的趋势;中膜CD68免疫阳性细胞的分布和中膜毛细血管的生成过程密切相关.结论:外膜可能是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径.
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人静脉移植物eNOS和P-eNOS的表达
目的 检测人静脉移植物中eNOS的表达及其活性.方法 应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再狭窄标本中eNOS的表达进行了检测,用抗磷酸化的eNOS抗体(P-eNOS)检测eNOS的活性.用激光共聚焦显微镜拍片,图片用Silicon Graphics Octane进行处理.结果 在正常静脉血管中,eNOS在内皮细胞不表达;在病变静脉血管,在内膜增生早期,eNOS在管腔面内皮细胞的表达明显上调,在外膜小血管的表达也增加,随着内膜增生的不断发展,eNOS在管腔面内皮细胞的表达明显下降,外膜小血管逐渐从外膜向中膜延伸.免疫双重染色证实eNOS和p-eNOS的表达共同定位于内皮细胞.结论 eNOS在静脉移植物中的表达模式提示其可能参与了中膜毛细血管的生成以及新内膜的形成.
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人静脉移植物MMP-2和Ⅰ、Ⅲ、Ⅵ型胶原纤维的表达
目的:探讨人静脉移植物MMP-2(基质金属蛋白酶)和Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅵ型胶原纤维的表达情况.方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中MMP-2、Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅵ型胶原纤维的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用Silicon Graphics Octane进行处理.结果:在正常静脉血管,有少量MMP-2的表达;Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅵ型胶原的表达较少.在静脉移植的血管,MMP-2的表达显著增加,是正常血管的3.5倍;Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅵ型胶原的表达明显上调,分别是正常血管的3.8倍、4.0倍和3.9倍.另外,统计分析表明上述蛋白质在新内膜的表达均显著高于在中膜的表达(P＜0.01).结论:在静脉移植物的新内膜,MMP-2的表达上调,细胞外基质Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅵ型胶原合成增加,提示这些重要分子在新.内膜的形成和静脉再狭窄的病理过程中具有重要的作用.
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静脉移植物中整合素α5β1的表达及其与再狭窄的关系
目的 检测人静脉移植物中整合素α5β1的表达.方法 应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再狭窄标本中整合素α5β1和α-smooth muscle actin(α-SMA)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphics Octane进行处理.结果 在正常静脉血管中,整合素α5β1在中膜平滑肌细胞和内皮细胞呈微弱表达;α-SMA在中膜平滑肌细胞表达;在病变静脉血管,整合素α5β1在中膜平滑肌细胞、内膜内皮细胞中的表达呈强阳性,在内膜平滑肌细胞中也有弱表达.α-SMA除在中膜平滑肌细胞表达外,在内膜平滑肌细胞也有表达.结论 静脉移植物整合素α5β1在中膜平滑肌细胞、内膜内皮细胞表达显著上调,提示整合素α5β1参与静脉移植物再狭窄的形成.
关键词： integrin α5β1 α-SMA 静脉移植物 共聚焦免疫荧光术
