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激发性CD28单抗对肿瘤患者外周血FOXP3+Treg细胞的下调作用及意义
目的 探究肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中FOXP3+Treg经CD28单抗激发后的改变及意义.方法 采用腹水诱生法及免疫亲和层析法进行单抗的制备和纯化,Ficoll密度梯度离心法获取外周血PBMC,经激发性CD28单抗10μg/mL共培养后经免疫荧光及流式细胞术分析其中FOXP3+Treg的表达以及FOXP3+Fas+Treg和FOXP3+FasL+Treg的表达.结果 免疫荧光和流式细胞术显示肿瘤患者外周血中FOXP3+Treg表达比例为(6.208±2.754)%,而对照组为(2.653±0.638)%.FOXP3+FasL+Treg细胞经CD28单抗活化后FasL表达上调为(7.252±2.23)%,而健康对照组为(7.96±2.938)%,FOXP3+Fas+Treg活化前后的比例分别为(1.467±0.590)%和(3.692±1.822)%.结论 肿瘤患者外周血中PBMC经CD28单抗激发后FOXP3+Treg的比例下调(P<0.01),提示该抗体能够使肿瘤患者的免疫功能得到一定程度的恢复与提高.
关键词： FOXP3+Treg PBMC Fas/FasL CD28单抗 -
影响淋巴细胞共刺激作用的体外实验研究
目的观察CD3单抗、CD28单抗、PHA和低剂量辐射对淋巴细胞增殖的影响,探讨影响T淋巴细胞信号转导的因素.方法分别以CD3单抗、CD28单抗、PHA和低剂量辐射作为作用因素,用3H-TdR掺入法观察在这些因素作用下,淋巴细胞增殖反应情况.结果 CD3单抗和CD28单抗联合刺激、PHA和低剂量辐射单独或联合处理,均可使淋巴细胞明显增殖.但CD3单抗和CD28单抗单独刺激,淋巴细胞增殖不明显.结论 CD3单抗和CD28单抗联合作用可使淋巴细胞有效增殖,PHA和低剂量辐射具有相似作用,对细胞免疫调节有重要意义.
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CD28单抗对γδT细胞增殖和杀伤胃癌细胞的增强作用
目的 探讨CD28单克隆抗体对人外周血γδT细胞体外增殖及杀伤胃癌BCG823、SGC7901细胞活性的影响.方法 分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别在有或无CD28单抗(20 μg/ml)参与的条件下,加入到含帕米膦酸、IL-2的RPMI1640完全培养基中诱导培养γδT细胞.在培养的第10天用台盼蓝染色计数细胞；采用流式细胞术检测各组γδT细胞的纯度及其穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达；用CCK-8试剂盒检测γδT细胞对胃癌细胞BCG823的体外杀伤效应.结果 在诱导培养10 d后,两组γδT细胞纯度均达到70％以上,与无CD28单抗对照组相比,CD28单抗组γδT细胞纯度显著高于对照组；CD28单抗组γδT细胞扩增倍数、穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达及对胃癌细胞BCG823和SGC7901的杀伤活性均显著高于无CD28单抗对照组.结论 CD28共刺激能增强γδT细胞增殖并通过上调穿孔素和颗粒酶B的表达增强其抗肿瘤活性.
