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电压-门控钠离子通道亚型nNav1.5在人脑胶质瘤中的表达
目的 研究电压-门控钠离子通道(VGSCs)亚型nNav1.5在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤级别的关系.方法 用免疫荧光技术检测nNav1.5蛋白在胶质瘤U251细胞株中的表达定位;按2007年WHO胶质瘤分级,将胶质瘤标本分为低级别组(WHO Ⅰ～Ⅱ级,29例)和高级别组(WHOⅢ～Ⅳ级,37例),另外13例对照组织标本来自颅脑损伤内减压手术中切除的脑挫裂伤组织.采用RT-PCR法、免疫组化法和Western Blot法分别检测nNav1.5 mRNA和蛋白在胶质瘤组和对照组的表达情况.结果 nNav1.5主要在胶质瘤细胞核内表达,nNav1.5 mRNA和蛋白在胶质瘤组织和对照组织中均有表达,但其在胶质瘤中表达水平均显著升高(P＜0.05),在高级别胶质瘤组的表达量亦高于低级别胶质瘤组,各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 nNav1.5在人脑胶质瘤中表达上调并与肿瘤的恶性程度呈正相关,nNav1.5有可能是胶质瘤恶性增殖的一个调控因子,有望成为胶质瘤的一个新标记物和治疗的新靶点.
关键词： 胶质瘤 电压-门控钠离子通道 幼稚型钠离子通道1.5型 -
siRNA靶向下调nNav1.5影响胶质瘤细胞增殖与凋亡研究
目的 研究下调电压-门控钠离子通道(VGSCs)幼稚型钠离子通道1.5 (nNav1.5)的表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响.方法 用免疫荧光技术检测nNav1.5在U251细胞的表达;设计合成nNav1.5的靶向小干扰核糖核酸(siRNA),脂质体瞬时转染至U251细胞,用实时定量逆转录酶-聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测nNav1.5的mRNA和蛋白水平变化,并判断siRNA干扰效果;用四唑盐比色法(MTT)和流式细胞仪检测siRNA对细胞增殖和凋亡的影响.结果 nNav1.5主要在U251细胞核中表达;siRNA可显著下调nNav1.5的mRNA和蛋白表达水平,并抑制细胞增殖、促进细胞凋亡.结论 nNav1.5在胶质瘤的发生发展过程中起着促进作用,可能成为胶质瘤诊断和治疗的一个新靶点.
关键词： 电压-门控钠离子通道 幼稚型钠离子通道1.5型 胶质瘤 增殖 凋亡
