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猪胰岛分离纯化文献资料
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负载猪源性CTLA4Ig的猪胰岛细胞阻断直接识别途径在异种移植中的作用
探讨负载供体源性CTLA4Ig的胰岛细胞通过阻断直接识别途径,诱导异种胰岛细胞抑制免疫耐受的可行性及有效性.方法:使用本实验小组前期构建的携带供体源性(猪)CTLA4-Ig的腺病毒载体(Adv-pCT-LA4-Ig)转染猪胰岛细胞,植入糖尿病大鼠肾包膜下,建立猪-大鼠异种胰岛移植模型,监测移植术后大鼠血糖变化及IL-4、γ-IFN的水平变化,检测移植物中pCTLA4-Ig、猪源性胰岛素(p-Insulin)表达情况.结果:1.大鼠血糖在移植术后即开始明显下降,于第3 d左右降至正常,三组大鼠血糖分别在移植术后6、7、35 d左右开始升高；2.三组大鼠术后胰岛平均存活时间为7.43±1.72 d、7.22±1.72d、34.50±4.14 d,实验组胰岛细胞存活时间较对照组明显延长(P＜0.01)；3.细胞因子变化:(1)γ-IFN:对照组在移植术后第1 d开始轻度升高,于第3 d后开始明显升高,第7 d达到高峰,此后缓慢升高；实验组在移植术后第1～28d波动较小,同术前相比无明显变化,在移植后第28d开始上升,第35 d开始急剧上升；(2)IL-4:实验组在移植术后第1 d开始下降,第7 d达到谷值；对照组在移植术后第3～5 d轻微上升,在移植后第28d开始下降至移植术前水平,第35 d开始急剧下降；4.病理学检查:实验组移植物无明显破坏,炎细胞浸润不明显；免疫组化可见大量pCTLA4-Ig、p-Insulin表达.结论:转染供体源性CTLA4-Ig的胰岛细胞通过阻断直接识别途径,可诱导异种胰岛细胞产生较长时间的免疫耐受.
