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伊文思蓝染色文献资料
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用伊文思蓝染色观察血管移植过程中血管保存液对内皮的损害
目的通过伊文思蓝(Evans blue)染色观察维拉帕米、硝酸甘油混合液(VG液)和盐酸罂粟碱溶液作为血管移植过程中的保存液对内皮层的损害,为临床应用提供依据.方法实验用雄性SD大鼠10只,随机分为2组,分别命名为A组和B组,每组5只.麻醉后SD大鼠迅速摘出胸主动脉在Krebs henseleit buffer(KHB)溶液(4℃)分割,每段长度约1cm,A组中分段后的血管分别被放入4℃的2种由不同公司提供的VG溶液中(分别称为VG1,VG2)、盐酸罂粟碱(1mg/ml)、阴性对照(KHB溶液,pH7.4)以及阳性对照(KHB溶液,pH7.4)中培养30min.B组分段后的血管分别被放入4℃的由2种VG液中不同的成分在林格液中配制后的液体(分别称为PEVG1,MaVG2)、阴性对照(KHB溶液,pH7.4)以及阳性对照(KHB溶液,pH7.4)中培养30min.取出经过上述液体处理后的血管段再经过30min连续充氧的KHB(37℃)液培养,后用Evans blue(0.17%)染色15s.而后浸泡于100μl甲酰胺溶液中过夜,取上清用分光光度计测定Evans blue浓度,再通过蛋白定量测定血管蛋白质含量,得出每微克蛋白质中的Evans blue含量.结果在A组中3种保存液与阳性对照均有差异(P《0.05),2种VG液与罂粟碱溶液有显著性差异(P《0.01).在B组PEVG 1与对照组有显著性差异(P《0.01).结论 VG液作为血管移植过程中的保存液可以大限度的减少内皮细胞损伤,相反用盐酸罂粟碱溶液可造成内皮细胞的明显损伤.作为动脉移植过程的保存液VG液具有更安全更有效的优势.
