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抗核小体抗体与系统性红斑狼疮的关系
目的:抗核小体抗体与系统性红斑狼疮关系.方法:采用德国IMTEC公司提供的ENA抗体免疫印迹试剂盒(包括抗SmD1、抗组蛋白、抗核小体抗体),操作规范的按着试剂盒说明书操作.结果:抗核小体阳性的病人11例,占12.5%,11例病人抗组蛋白全部阳性,有2例伴随抗SmD1阳性;抗组蛋白阳性的病人21例,占23.9%.抗SmD1阳性的病人12例,占13.6%.结论:抗核小体抗体对系统性红斑狼疮(SLE)诊断敏感性高、特异性强,与SLE疾病活动性密切相关.诊断SLE不应该只注重抗Sm、抗dsDNA两种以前认为是SLE特征性抗体,而应该联合检测抗核小体抗体,这样对诊断SLE意义更大.
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SmD1蛋白原核可溶性表达及其IgG抗体检测应用
目的获取可溶性SmD1重组蛋白，并建立抗SmD1抗体ELISA检测方法。方法采用 PCR方法扩增SmD1基因，构建表达质粒pET‐21a‐SmD1，转化到大肠杆菌BL21，在16℃条件下，1 mM IPTG诱导表达10 h ，SDS‐PAGE电泳分析表达产物，镍柱亲和层析纯化，Bradford法测定蛋白浓度，建立间接 ELISA法，检测215例常见自身免疫性疾病血清样本。结果通过双酶切和测序结果表明成功构建表达质粒pET‐21a‐SmD1，SDS‐PAGE 电泳得知目的蛋白以可溶性表达为主，经镍柱纯化获得单一目的蛋白，浓度为0．62 mg／mL。46．1％ SLE患者呈抗SmD1抗体阳性，其次是MCTD（20％），其他疾病的检出率均小于15％，SLE组与非SLE组的灵敏度差异有统计学意义（P＜0．05）。抗SmD1抗体对SLE特异性为93％，高于非SLE组，其他疾病组均小于80％。结论可溶性表达的SmD1蛋白具有较好的抗原性，抗SmD1抗体有助于临床辅助诊断SLE。
