首页 > 文献资料
-
锌对神经病理性痛小鼠损伤的海马神经元的实验研究
目的：探讨锌剂对神经病理性痛小鼠认知功能及海马前脑啡肽( PENK)表达的影响。方法 C57/BL6小鼠24只,2~3月龄,体重18~25 g,采用随机数字表法分为3组( n＝8)：假手术组( S组)、神经病理性痛组( NP组)和高锌喂养组( Zn组)。采用脊神经结扎横切术制备神经病理性痛模型,造模成功后,采用尼氏染色法检测各组小鼠海马CA1区神经元变化,应用水迷宫方法检测各组小鼠学习及认知功能,并用Western blot法测定海马PENK的表达水平。结果与S组比较,NP组海马神经元数目减少,形态不规则,学习认知功能显著损伤,海马PENK表达显著增加(P<0.05),与NP 组比较,Zn组马神经元数目增加,损伤恢复,学习认知功能提升,海马PENK表达减少(P<0.05)。结论锌对神经病理性痛小鼠损伤海马神经元具有保护作用,其机制与PENK表达变化可能有关。
-
散偏汤对偏头痛模型大鼠中脑、三叉神经节CGRP、PENK基因、蛋白表达的影响
目的 观察散偏汤对偏头痛模型大鼠中脑、三叉神经节降钙素基因相关肽(CGRP)、PENK (PENK)基因、蛋白表达的影响.方法 24只健康SPF级SD大鼠随机分为4组:生理盐水组、偏头痛模型组、琥珀酸舒马普坦组、散偏汤组.颈背部皮下注射硝酸甘油连续3周复制实验性偏头痛动物模型,第2次注射硝酸甘油后给予药物干预,1周后,第3次注射硝酸甘油2h后取材,Western blotting法测定三叉神经节CGRP、PENK蛋白表达变化;实时聚合酶链反应PCR (Real-time PCR)检测各组大鼠中脑CGRP、PENK基因表达变化.结果 Western blotting法检测:偏头痛模型组大鼠三叉神经节中CGRP蛋白表达与生理盐水组差异有统计学意义(P＜ 0.05),与琥珀酸舒马普坦组和散偏汤组差异有统计学意义(P＜0.05),舒马普坦组与散偏汤组差异有统计学意义(P＞0.05);偏头痛模型组三叉神经节PENK蛋白表达较生理盐水组降低(P＜0.05),散偏汤组和琥珀酸舒马普坦组干预后PENK蛋白表达升高,与模型组差异有统计学意义(P＜0.05);Real-Time PCR检测:偏头痛模型组大鼠中脑CGRP基因表达与生理盐水组差异有统计学意义(P＜0.05);与琥珀酸舒马普坦组和散偏汤组差异有统计学意义(P＜0.05);偏头痛模型组中脑PENK蛋白表达较生理盐水组降低(P＞0.05),散偏汤组和琥珀酸舒马普坦组中脑PENK基因表达与模型组比较升高(P＜0.05).结论 散偏汤可以抑制伤害性感受传导通路中CGRP的基因及蛋白表达,升高三叉神经节中PENK蛋白的表达,对偏头痛大鼠CGRP基因及蛋白的表达起抑制作用,能抑制痛觉信息的传递,并对内啡肽系统的镇痛作用有一定影响.
-
PENK基因过表达克隆载体构建及其功能意义
目的 构建人前脑啡肽(homo sapiens proenkephalin,PENK)基因过表达克隆载体,研究其功能意义.方法 用HIV载体质粒与PENK基因连接,构建成功后用双酶切及测序验证PENK克隆重组体的成功构建.用293Ta包装慢病毒后转染HT1080以测定慢病毒滴度.用PENK-HIV慢病毒颗粒转染PC12细胞,同步设立对照组(未转染PENK),对两组细胞转染后48 h采集图片并经行细胞计数,收集细胞,用RT-PCR检测各组中PENK mRNA表达变化.结果 PENK克隆载体酶切及测序结果都验证了克隆构建成功.PENK-HIV慢病毒成功转染PC12细胞48 h后,对照组细胞数为88.60±2.55,而PENK转染组细胞数为127.93±2.48,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 用HIV载体质粒成功构建的PENK克隆重组体可能会促进PC12细胞的生长.
