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HIV载体质粒文献资料
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PENK基因过表达克隆载体构建及其功能意义
目的 构建人前脑啡肽(homo sapiens proenkephalin,PENK)基因过表达克隆载体,研究其功能意义.方法 用HIV载体质粒与PENK基因连接,构建成功后用双酶切及测序验证PENK克隆重组体的成功构建.用293Ta包装慢病毒后转染HT1080以测定慢病毒滴度.用PENK-HIV慢病毒颗粒转染PC12细胞,同步设立对照组(未转染PENK),对两组细胞转染后48 h采集图片并经行细胞计数,收集细胞,用RT-PCR检测各组中PENK mRNA表达变化.结果 PENK克隆载体酶切及测序结果都验证了克隆构建成功.PENK-HIV慢病毒成功转染PC12细胞48 h后,对照组细胞数为88.60±2.55,而PENK转染组细胞数为127.93±2.48,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 用HIV载体质粒成功构建的PENK克隆重组体可能会促进PC12细胞的生长.
