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抑癌基因FBXW7与恶性肿瘤相关研究进展
F框/WD-40域蛋白7(F-box and WD-40 domain protein 7,FBXW7)基因,又称FBW7或hCDC4,是泛素蛋白酶体降解途径的重要识别因子之一,参与靶向降解多种癌蛋白,进而调控恶性肿瘤的发生发展过程,目前已被认为是一种抑癌基因.本综述着重探索FBXW7基因在恶性肿瘤发生发展中的作用,旨在为肿瘤治疗提供新的切入点和诊疗思路.
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FBXW7基因点突变对结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移、侵袭和抗凋亡能力的影响
目的:探讨FBXW7基因点突变对结直肠癌细胞株HCT-116增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响.方法:通过构建FBXW7基因野生型及突变型过表达的重组载体,并将其转染HCT-116细胞,应用Western blotting检测转染后FBXW7蛋白表达情况.CCK-8检测细胞增殖能力,平板细胞克隆形成实验(HTCA)检测肿瘤细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕及Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移和侵袭能力.结果:转染野生型FBXW7基因的HCT-116细胞中FBXW7蛋白表达水平高于对照组(转染突变型FBXW7基因的HCT-116细胞)、阴性对照组(转染空质粒载体pEZ-M90的HCT-116细胞)及空白对照组(未进行任何特殊处理的HCT-116细胞)(均P<0.05).转染野生型FBXW7的HCT-116细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力相较于其余各组均显著下降(均P<0.05),且细胞凋亡率显著升高(P<0.05).结论:FBXW7基因点突变可使其蛋白表达水平降低,从而促进结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制其凋亡.
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FBXW7过表达可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移并促进细胞凋亡
目的:探讨F框/WD-40域蛋白7(F-box and WD-40 domain protein 7,FBXW7)基因过表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响.方法:构建FBXW7过表达的重组载体pEZ-M02-FBXW7质粒,并将其转染乳腺癌MCF-7细胞,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测pEZ-M02-FBXW7转染后MCF-7细胞中FBXW7 mRNA和蛋白的表达,CCK-8和Transwell法检测细胞增殖、迁移和侵袭情况,FCM法检测细胞周期和细胞凋亡情况.结果:pEZ-M02-FBXW7转染后,乳腺癌MCF-7细胞中FBXW7 mRNA和蛋白的表达水平高于阴性对照组(将空载体pEZ-M02质粒转染至MCF-7细胞)和空白对照组(未进行转染的MCF-7细胞)(P值均<0.01),MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显下降(P值均<0.05),MCF-7细胞被阻滞于G0/G1期(P<0.05),且细胞凋亡率明显升高(P<0.05).结论:FBXW7高表达可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、侵袭和迁移,并可促进细胞凋亡.