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ALK2基因敲除小鼠的饲养繁育与基因型鉴定
目的:为了繁育和鉴定体内ALK2基因被敲除的小鼠,特将从美国引进的ALK2基因敲除小鼠进行饲养繁育,继续保种;以及初步探究激活素受体样激酶2(Alk2)功能缺陷对出生后小鼠在生存能力、繁殖能力、主要组织器官的生长状态等方面的影响.方法:首先用Cre-loxp重组酶系统培育出ALK2条件基因敲除小鼠,通过基因型鉴定筛选出实验组(基因型:Osx-Cre;Alk2fx/fx)和对照组(基因型:Osx-Cre;Alk2fx/+).结果:成功饲养和繁殖出从美国引进的小鼠,并成功从中筛选出ALK2基因敲除小鼠.结论:采用正确的饲养、繁殖及基因鉴定方法对筛选出基因敲除小鼠及继续保种意义重大;初步探究小鼠ALK2基因敲除后小鼠的变化为进一步深入研究小鼠的组织器官的生长发育方面的变化及机理奠定了基础.
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初步探讨石蜡标本制备方案的选择及ALK2在小鼠牙胚中的表达
目的:探讨ALK2在小鼠牙胚中的表达及牙胚标本和切片的制备方案.方法:取E12.5-E18.5的小鼠胚胎,4%多聚甲醛于4℃固定24 h后,按脱水总时间23 h和8.5 h两种方案脱水,石蜡包埋切片后,HE染色观察标本制备情况,免疫组织化学染色观察ALK2在牙胚中的表达情况.结果:大体显微镜下观察到的胚胎形态和文献所述一致.脱水总时间8.5 h的脱水方案所制备的石蜡切片平整、完整、无裂痕,染色质量良好,牙胚形态完整,结构清楚.免疫组化染色发现,ALK2广泛地表达于蕾状期的口腔上皮和间充质,帽状期及钟状期的成釉器、牙乳头.结论:减少脱水时间,不影响切片和染色质量,可提高实验效率.ALK2广泛表达于牙胚早期,可能在牙发育中具有重要作用.