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原代大鼠肝脏细胞文献资料
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活性氧在微囊藻毒素-LR诱导细胞凋亡效应中的作用探讨
[目的] 研究微囊藻毒素-LR(MC-LR) 对原代大鼠肝脏细胞的促凋亡效应以及探讨活性氧(ROS)在这一效应中的作用.[方法] 采用胶原酶灌注法获取原代大鼠肝脏细胞,用William'sE培养液重悬后接种于铺被鼠尾胶原的孔板内,分为1个对照组和4个染毒组,37℃、5%C02条件下培养3h后换液并染毒各梯度浓度的MC-LR,使各染毒组毒物终浓度分别为1×10<'-5>、1×10<'-6>、1×10<'-7>、1×10<'-8> mol/L.染毒相应时间后,采用中性红比色实验检测细胞存活率,采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞内ROS含量.[结果] 中性红比色实验发现,至染毒期末观察到1×10<'-5>、1×10<'-6> mol/L两个染毒组的肝脏细胞几乎全部死亡(>95%),1 x 10<'-7>mol/L染毒组部分肝脏细胞死亡(约30%);流式细胞术观察到MCLR染毒后早期(5min)诱导细胞凋亡,同时观察到肝脏细胞内短时间(15 min)快速产生大量的ROS.[结论]MC-LR诱导原代大鼠肝脏细胞快速产生大量的ROS,这可能是MC-LR诱导细胞凋亡并终导致细胞死亡的毒性作用机制之一.
