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六味地黄丸含药血清对MC3T3-E1细胞增殖以及对Runx2、 FOXO1mRNA表达的影响
目的 探讨六味地黄丸含药血清对MC3T3-E1细胞增殖以及对Runx2、FOXO1 mRNA表达的影响.方法 制作六味地黄丸混悬液,对成年Wistar大鼠进行灌胃,获取六味地黄丸含药血清.常规培养MC3T3-E1细胞24 h后更换含10％不同浓度含药血清的培养基,分别培养48 h和72 h后用CCK-8法检测MC3T3-E1细胞的增殖;对MC3T3-E1细胞进行诱导培养22天后进行饥饿培养24h,随后更换含10％不同浓度的含药血清,培养72 h后检测Runx2、FOXO1 mRNA表达.结果 六味地黄丸含药血清能促进MC3T3-E1细胞增殖,并且呈现一定的剂量依赖性;同时六味地黄丸含药血清各剂量组均能明显促进Runx2 mRNA的表达(P＜0.01),高剂量组的表达明显高于低剂量组(P＜0.01).高剂量组的FOX01 mRNA表达明显高于其他3组(P＜0.01).结论 六味地黄丸含药血清能促进MC3T3-E1细胞增殖,同时能促进Runx2、FOXO1 mRNA表达.
关键词： 六味地黄丸 含药血清 MC3T3-E1细胞 Runx2 FOXOl -
泻浊解毒通络法对糖尿病痛风模型大鼠血清FOXOL、 VCAM-1及肾脏病理的影响
目的 观察具有泻浊解毒通络作用的萆苓祛痛方对糖尿病痛风模型大鼠叉头转录因子(FOXOL)、细胞黏附分子(VCAM-1)及肾脏病理的影响.方法 选择健康雄性SD大鼠50只,体质量(200± 20)g,除正常组外,其余予高脂饲料喂养并联合小剂量链脲佐菌素35 mg/kg腹腔注射1次,以血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病模型.4天后关节腔注射5％尿酸钠溶液1次,诱导痛风模型,模型成功后,萆苓祛痛方组、吲哚美辛组、吡格列酮组继续给药21d,正常组、模型组予等量0.9％ NaCl溶液,21 d后取血测定FOXOL、VCAM-1、CysC,PG、UA、LDL-C,留取肾脏,观察肾脏病理变化.结果 与正常组比较,模型组FOXOL、VCAM-1、Cys-C明显升高(P＜0.01);给药后,各药物组的上述指标显著降低(P＜0.01);萆苓祛痛方组上述指标优于吡格列酮组(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组血糖、LDL-C明显升高(P＜0.01);灌胃后,药物组血糖、LDL-C显著下降(P＜0.01).造模后,模型组血UA、SCr明显升高(P＜0.01),用药后各药物组血UA下降(P＜0.01);萆苓祛痛方组SCr下降(P＜0.05).相关分析表明,高血糖与高尿酸血症呈相关性(r=0.42,P＜0.05).病理报告示模型组大鼠肾小管间质充血肿胀,空泡样变性,有大量炎细胞浸润.予萆苓祛痛方后病变程度明显减低,肾小管见少量炎细胞浸润.结论 具有泻浊解毒通络作用的萆苓祛痛方有良好的降糖、降尿酸、降LDL-C疗效;高血糖与高尿酸具有相关性,可明显下调FOXOL、VCAM-1、Cys-C的高表达,减轻炎症因子对肾脏病理的影响.
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白藜芦醇-Sirtl-Foxo1调控通路对缺氧心肌细胞的保护作用
目的 研究白藜芦醇-Sirtl-Foxol调控通路时缺氧心肌细胞的保护作用.方法 将大鼠心肌细胞株H9C2培养48 h后,随机分为5组,即20 μmol/L白藜芦醇(resveratrol,Res)干预组、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)对照组、40 mmol/L尼克酰胺(nicotinamide,Nam)干预组、Nam空白对照组及正常对照组.培养24 h后终止培养,用RT-PCR法和免疫细胞化学染色法榆测Sirtl、Foxol、p27、Bim mRNA及其蛋白表达水平的变化;用TUNEL法及流式细胞仪(flow cytometer,FCM)分析细胞凋亡和细胞周期.结果 20 μmol/L Res 干预组可使Sirtl mRNA及SIRT1蛋白表达的水平增加.Sirtl 可通过抑制Foxol mRNA的转录活性而调节其下游基因p27及Bim的表达.SIRT1的高表达可使细胞周期延长,细胞调亡减少,结论 Res干预可使SIRT1表达增加.Sirtl可能通过对Foxol及其下游基因Bim、p27的调控,延长心肌细胞的细胞周期,减少其凋亡.
