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Genistein、Na3Vo4对椎间盘软骨细胞作用效应的研究
目的 探讨染料木黄酮(Genistein)和正钒酸钠(sodium orthovanadate,Na3Vo4)对椎间盘软骨终板软骨细胞的作用.方法 采用酶消化法培养大鼠椎间盘软骨终板软骨细胞,将不同浓度的Genistein(15μmol/L、35μmol/L、55μmol/L)、Na3Vo4(10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)加入到培养的第Ⅲ代软骨细胞中,培养7 d;MTT法检测软骨细胞增殖率,RT-PCR检测Ⅱ型、Ⅸ型胶原和Aggrecan mRNA的表达,定量RT-PCR检测IGFR、PTPn1 mRNA的表达.结果 干预7 d后,15 μmol/LGenistein组各项指标与模型组比较变化不明显(P＞0.05);35μmol/L Genistein组与模型组比较,软骨细胞增殖率、Ⅱ型胶原及aggrecan mRNA表达显著降低(P＜0.01),IGFR mRNA表达较模型组有所降低,但无显著性差异(P＞0.05);55μmol/LGenistein组与模型组比较,软骨细胞增殖率、aggrecan基因表达显著下降(P＜0.01),Ⅸ型胶原、IGFR mRNA表达较模型组有所降低(P＜0.05);Genistein各浓度组PTPn1 mRNA表达无显著变化(P＞0.05).与模型组比较,10μmol/L Na3Vo4组各项检测指标变化不明显(P＞0.05);30μmol/L Na3Vo4组Ⅱ、Ⅸ型胶原mRNA表达明显降低(P＜0.01);20μmol/L及30 μmol/L Na3Vo4组软骨细胞增殖率明显下降(P＜0.01),aggrecan及PTPn1 mRNA表达显著降低(P＜0.05),IGFRmRNA表达无显著变化(P＞0.05).结论 Genistein可特异性抑制PTKs中IGFR基因表达,适当剂量Na3Vo4可抑制PTPs中PTPn1的基因表达,降低软骨细胞生物学功能.
