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肾衰康灌肠液含药血清对HK-2细胞缺氧/复氧损伤的预防作用
目的 考察肾衰康灌肠液含药血清对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧损伤的预防作用.方法 家兔灌肠给药后采血,离心取血清,分为空白组、PBS组及含药血清高、中、低剂量组.各组血清预培养HK-2细胞24h后,将细胞随机分为对照组、PBS组及含药血清高、中、低剂量组,二氯化钴(CoCl2)进行缺氧/复氧造模,CFSE/PI染色、Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞分析检测造模后细胞凋亡/死亡率,ROS荧光探针检测观察含药血清对空白组、模型组、预防组细胞ROS水平的影响,PCR技术测定PBS组、含药血清组细胞AKT、NF-κB、MAPK mRNA表达.结果 与对照组、PBS组比较,含药血清组细胞死亡率明显降低,以高剂量组显著,并表现出明显的凋亡/死亡率抑制作用.造模后,预防组细胞ROS升高水平明显低于模型组,而且恢复至正常水平时间明显缩短.含药血清组AKT、NF-κB、MAPK mRNA表达先下降(0～4 h)再逐渐上升(4～12h),并对NF-κB、MAPK mRNA表达呈现一定剂量依赖性,与PBS组比较有显著差异(P＜0.05).结论 肾衰康灌肠液含药血清可预防HK-2细胞缺氧/复氧损伤,其机制可能与抑制细胞氧化应激、减少细胞ROS过量聚积有关.
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Wnt/β-catenin通路在肾衰康灌肠液抑制HK-2细胞缺氧/复氧损伤的作用
目的 观察肾衰康灌肠液(大黄、丹参、红花、黄芪)含药血清对缺氧/复氧损伤人肾小管上皮细胞的保护作用,并探讨其对Wnt/β-catenin通路的影响.方法 将新西兰大白兔随机分为对照组、肾衰康高剂量组、PBS组,分别予相应药物灌肠3d后取血清.以对照组、PBS组、肾衰康高剂量组、肾衰康中剂量组、肾衰康低剂量组兔血清分别处理缺氧/复氧HK-2细胞.以ROS荧光探针检测H/R损伤发生.CFSE/PI法、流式细胞分析联合Annexin V-FITC/PI法分析细胞的损伤/凋亡情况.荧光定量PCR技术考察药物对Wnt4、β-catenin mRNA表达的影响.结果 与造模前相比,造模后细胞内ROS表达的荧光强度明显增高.CFSE/PI双染显示,与对照组和PBS组相比,肾衰康高、中、低剂量组细胞死亡率明显降低,且以肾衰康高剂量组死亡率低.Annexin V-FITC/PI联合流式细胞术检测显示,与对照组[12 h,(45.6±2.2)％]和PBS组[12 h,(41.6±0.7)％]相比,肾衰康低、中、高剂量组均有明显的凋亡/死亡抑制[12h,低剂量组(14.8±0.3)％,中剂量组(1o.3±0.6)％,高剂量组(12.9±0.9)％].荧光定量PCR结果显示,肾衰康灌肠液含药血清对Wnt4 mRNA表达有显著上调作用,对β-caterin mRNA表达有显著双向调节作用(P＜0.05).结论 肾衰康灌肠液含药血清对缺氧/复氧损伤HK-2细胞的凋亡/死亡有明显的抑制效果,其作用可能与激活Wnt/β-catenin通路有关.
关键词： 肾衰康灌肠液 缺氧/复氧 H/R HK-2细胞 Wnt/β-catenin -
肾衰康灌肠液治疗慢性肾功能衰竭的护理
自2005年3月～2005年10月,本院肾病科采用"肾衰康灌肠液"治疗慢性肾功能衰竭(CRF)65例,取得一定疗效,现将护理体会总结如下.
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肾衰康灌肠液对慢性肾功能衰竭大鼠保护作用的研究
目的 观察肾衰康灌肠液对慢性肾功能衰竭大鼠的影响.方法 采用"单肾切除加腺嘌呤灌胃法"建立大鼠肾衰模型.28d后,治疗组大鼠每天用高、中、低剂量的肾衰康灌肠液,尿毒清组用20%尿毒清混悬液灌胃.60d后收集尿液,处死大鼠,取血、留取肾组织,测定血Ca2+ 、P3+及血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、中分子物质(MMS)和24小时尿蛋白定量、尿Ca2+ 、P3+,进行统计学处理.结果 肾衰康灌肠液对慢性肾衰竭大鼠的血Ca2+ 、P3+及Scr、BUN和24小时尿蛋白定量、尿Ca2+ 、P3+有不同程度的改善.结论 肾衰康灌肠液对大鼠慢性肾衰竭有一定的保护作用.
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肾衰康灌肠液在急性肾缺血再灌注损伤中的作用及对p38-MAPK信号通路的影响
目的:研究肾衰康灌肠液在肾缺血再灌注损伤中的作用及其对p38-MAPK信号通路的影响.方法:采用新西兰大白兔灌肠制备肾衰康灌肠液含药血清,体外培养人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞),并将其随机分为缺血再灌注组、PBS组、低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组,共5组.PBS组常规培养,对缺血再灌注组和低、中、高剂量干预组行急性缺血再灌注损伤造模.缺血再灌注开始后立即给予低剂量干预组(25％高剂量血清+75％空白血清)、中剂量干预组(50％高剂量血清+50％空白血清)、高剂量干预组(100％高剂量血清)含药血清处理.与此同时,缺血再灌注组和PBS组分别给予等量PBS灌肠后所得的兔血清,PBS组不予以细胞造模处理.操作0、4、8、12、24和48h后,分别采用RT-PCR法检测细胞中P38MAPK基因表达情况,采用Annexin V-FITC/PI联合流式细胞术分析细胞凋亡情况.结果:4h时,低剂量组细胞凋亡率为(13.5±0.2)％,中剂量组为(7.8±2.1)％,高剂量组为(13.3±0.1)％;12h时,低剂量组细胞凋亡率为(14.8±0.3％),中剂量组为(10.3±0.6)％,高剂量组为(12.9±0.9％),均显著低于对照组[4h,(47.8±3.5)％;12h,(45.6±2.2)％]和PBS组[4h,(45.7±1.2)％;12h,(41.6±0.7)％].含药血清处理模型细胞4h后,与PBS组比较,低、中、高剂量组中MAPK基因表达均显著降低(P＜0.05),且从8～12h,MAPK基因表达升高,逐渐恢复至正常水平.结论:肾衰康灌肠液可抑制肾缺血再灌注模型中HK-2细胞凋亡,可能是通过抑制p38-MAPK基因表达实现的.
关键词： 急性肾缺血再灌注损伤 肾衰康灌肠液 p38-MAPK 细胞死亡/凋亡率 -
黄槐温胆汤和肾衰康灌肠液治疗急性肾功能衰竭的实验研究
目的 探讨黄槐温胆汤和肾衰康灌肠液对急性肾功能衰竭的作用.方法 SD大鼠用庆大霉素腹腔内注射制成急性肾功能衰竭模型.造模后随机分为黄槐温胆汤组、肾衰康灌肠液组、空白病理模型对照组和对照组,分别用黄槐温胆汤、肾衰康灌肠液和生理盐水治疗.治疗后取血清测肾功能,取肾脏组织评估肾小管损伤.结果 黄槐温胆汤治疗组和肾衰康灌肠液组尿素氮、肌酐水平较空白病理模型对照组低,但仍高于对照组.黄槐温胆汤治疗组和肾衰康灌肠液组肾小管损伤情况较空白病理模型对照组轻,但仍重于对照组.结论 黄槐温胆汤和肾衰康灌肠液对急性肾小管坏死具有显著的保护作用.
