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HPLC-ELSD同时测定当归补血总苷中黄芪甲苷和黄芪皂苷Ⅱ
目的 建立HPLC-ELSD测定当归补血总苷(黄芪、当归)中的黄芪甲苷和黄芪皂苷Ⅱ的方法.方法 色谱柱Kromail C18(4.6mm×250 mm,5μm)；流动相为乙腈-水(37.5∶62.5)；体积流量0.8 mL/min;ELSD参数:漂移管温度100℃；N2气流体积流量2.60 L/min.结果 黄芪甲苷在0.85 ～6.76 μg之间呈良好的线性关系(r=0.999 2),平均回收率为98.8％,RSD为1.50％.黄芪皂苷Ⅱ在1.05～8.4 μg之间呈良好的线性关系(r=0.999 4),平均回收率为95.7％,RSD为2.70％.结论 该法精密度、重复性良好,简便、快速、准确,适用于当归补血总苷中黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ的测定.
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当归补血总苷抑制TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞转分化及胶原表达
目的 研究当归补血总苷(TGDGBX)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HLF-Ⅰ)转分化及胶原表达的调控作用.方法 体外培养HLF-Ⅰ,根据不同的处理方法分为5组,A组:对照组;B组:加入TGF-β1(1 ng/ml);C组:加入TGF-β1(1 ng/ml)+TGDGBX(0.03 mg/ml);D组:加入TGF-β1(1 ng/ml)+TGDGBX(0.09 mg/ml);E组:加入TGF-β1(1 ng/ml)+TGDGBX(0.27 mg/ml).MMT法检测各组HLF-Ⅰ的增殖情况,羟脯氨酸消化法检测细胞上清液中羟脯氨酸(HYP)含量,ELISA法检测细胞上清液基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的含量.半定量RT-PCR法检测Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)mRNA、Ⅲ胶原(COL-Ⅲ)mRNA、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA以及MMP-9 mRNA的表达情况.结果 与B组相比,C、D、E组明显抑制TGF-β1诱导的HLF-Ⅰ细胞增殖(P<0.05);降低细胞上清液中HYP的含量(P<0.05);减少HLF-Ⅰ的COL-Ⅰ mRNA、COL-Ⅲ mRNA以及α-SMA mRNA的表达(P<0.05);增加细胞上清液中MMP-9的含量(P<0.05).D和E组与B组相比,显著提高HLF-Ⅰ的MMP-9 mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01).结论 TGDGBX可抑制TGF-β1诱导的HLF-Ⅰ转分化和胶原表达,其抑制胶原表达的作用可能是通过增加MMP-9的表达来实现的.
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HPLC法测定当归补血总苷中阿魏酸的含量
目的 建立RP-HPLC法测定当归补血总苷中阿魏酸含量的方法.方法 ODS C18柱为固定相(150×4.6 mm,5 μm),乙腈-1%醋酸(17:83)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长:320 nm,柱温为30℃.结果 阿魏酸的线性范围为3.3~26.4 μg/ml (r=0.999 8),平均回收率为99.6%(RSD=1.6%).结论 本方法 简便、快速,重现性好,结果 准确可靠,可作为当归补血总苷的质控方法 之一.
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紫外分光光度法测定当归补血汤中的总苷含量
目的 建立用紫外分光光度法测定当归补血汤中总苷含量的方法.方法 采用紫外分光光度法,以黄芪甲苷为对照品,在波长540 nm处测定当归补血总苷含量.结果 黄芪甲苷的线性范围为4.167-41.667 μg*ml-1(r2= 0.9986),平均回收率为99.3%,RSD=0.74% (n=5).结论 本方法准确、简便、快速可行,适用于当归补血汤中总苷的含量测定.
