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右归丸鼠血清恢复冻融小鼠卵巢的功能
目的 探讨右归丸(熟地黄,附子,肉桂,山药,吴茱萸,菟丝子,鹿角胶,枸杞子,当归,盐杜仲)鼠血清对程序化冻融小鼠卵巢组织功能的影响.方法 40只6周龄ICR小鼠经孕马血清促性腺激素刺激,其卵巢经液氮中冻存2d后复苏,将所有卵巢组织随机分为空白组、空白血清组、尿促卵泡素组及右归丸血清组.所有卵巢经特殊DMEM高糖培养基培养24 h后从左侧卵巢中取出未成熟卵母细胞,微滴法培养24 h观察并计算小鼠卵细胞体外第一极体(PB1)排出率.并通过酶联免疫吸附法检测培养基中雌二醇(E2)水平,右侧卵巢组织中小鼠成熟促进因子(MPF)、卵泡刺激素受体(FSH-R)及黄体生成激素受体(LH-R)水平.结果 卵巢组织冻融后,右归丸血清组的卵母细胞成熟率、卵巢组织中的MPF、FSH-R和LH-R的水平高于尿促卵泡素阳性组和空白组.右归丸血清组体外培养基中E2水平较空白血清组高,并显著高于空白组.结论 右归丸有可能在临床上成为一种辅助冻存卵巢组织功能恢复有效的补肾中药复方.
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着床前遗传学诊断后囊胚冻融的实验研究与临床应用
目的:探讨着床前遗传学诊断(PGD)后囊胚冻融的特点及临床应用.方法:①实验研究:对41枚PGD诊断为遗传学异常的废弃囊胚进行冻融研究,其中27枚囊胚进行程序化冻融,14枚囊胚进行玻璃化冻融.分别观察囊胚冷冻前及解冻后的形态学特点,比较2种冻融方法的囊胚解冻复苏率.②临床应用:对14对夫妇在PGD新鲜周期移植后仍有剩余的遗传诊断正常的40枚囊胚给予冷冻保存.其中,6对夫妇的12枚胚胎进行了解冻移植.结果:①实验研究:27枚进行程序化冻融的囊胚解冻后复苏22枚,复苏率为81.48％(22/27); 14枚进行玻璃化冻融的囊胚解冻后复苏11枚,复苏率为78.57％(11/14),2种冻融方法的囊胚解冻复苏率无统计学差异(P＞0.05).无论何种冻融方法,解冻后复苏存活的囊胚在体外培养30 min均可以观察到复苏现象,体外培养4h囊腔均扩张.②临床应用:14对有剩余囊胚冻存的夫妇中,6对夫妇新鲜周期即获得临床持续妊娠,另外还有1对夫妇早期自然流产,1对夫妇宫外孕.其余新鲜周期未孕的6对夫妇进行了囊胚解冻移植,其中3对夫妇解冻周期获得了临床妊娠.结论:经PGD诊断后的囊胚,无论是程序化冻融还是玻璃化冻融,均可以获得满意的解冻复苏率.PGD诊断后囊胚冻融技术的成熟与发展可以提高PGD夫妇的累积妊娠率.
关键词： 着床前遗传学诊断(PGD) 囊胚 程序化冻融 玻璃化冻融 复苏率
