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SELEX 适体技术文献资料
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特异性结合白色念珠菌（1，3）-β-D-葡聚糖单链 DNA 适配子的筛选及其应用
目的：通过指数富集的配基系统进化技术（systematic evolution of ligands by exponential enrichment ，SELEX）筛选能与高亲和力（1，3）‐β‐D‐葡聚糖特异性结合的适配子，并用该适配子建立双适配子夹心酶联寡聚核苷酸吸附试验（enzyme‐linked oligonucleotide assay ，ELONA）来对深部真菌感染血浆进行辅助诊断。方法提取白色念珠菌 ATCC10231株细胞壁（1，3）‐β‐D‐葡聚糖，通过 SELEX 筛选获得能与（1，3）‐β‐D‐葡聚糖特异性结合的高亲和力单链 DNA 适配子，并用该适配子建立双适配子夹心ELONA 来检测深部真菌感染血浆中的（1，3）‐β‐D‐葡聚糖。结果从白色念珠菌细胞壁中成功提取了高聚合度（1，3）‐β‐D‐葡聚糖，并通过体外酶解获得可溶性低聚合度（1，3）‐β‐D‐葡聚糖作为筛选靶标。用SELEX 进行12轮筛选后，从初始单链 DNA 文库中获得2个高亲和力适配子 AU1和 AD1，检测发现它们并非结合于（1，3）‐β‐D‐葡聚糖的同一表位。双适配子夹心 ELONA 检测深部真菌感染血浆中（1，3）‐β‐D‐葡聚糖的特异性和敏感度分别为91．94％和92．31％。结论从初始单链 DNA 文库中成功获得可与（1，3）‐β‐D‐葡聚糖特异结合的高亲和力适配子，为深部真菌感染新型诊断试剂的研发奠定了基础。
