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  • Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶通路阻断剂Y-27632对大鼠脂肪组织源性干细胞向神经元样细胞分化的诱导作用

    作者:任宏媛;徐洪;于婉莹;袁媛;孙月;杨方;吴庆文

    目的:研究Y-27632对大鼠脂肪间充质干细胞向神经元样细胞诱导分化作用.方法:原代培养大鼠脂肪间充质干细胞,将3~6代细胞随机分成4组,无血清对照组、无血清诱导组、血清对照组、血清诱导组.采用倒置显微镜观察细胞形态,免疫细胞化学检测巢蛋白、神经元特异性核心抗原(NeuN)、血清应答因子(SRF)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、vimentin的表达,免疫印迹检测SRF、vimentin的表达.结果:在无血清情况下,Y-27632能够诱导脂肪组织源性干细胞(ADSCs)出现典型的神经元样细胞形态,免疫细胞化学检测显示神经元特异性蛋白巢蛋白、NeuN的阳性表达;而在10%血清条件下,这种诱导效应被抑制,巢蛋白、NeuN无阳性表达.免疫细胞化学染色显示无血清条件下,Y-27632能够显著抑制α-SMA的表达,同时SRF和vimentin也具有较强的阳性表达.免疫印迹检测显示无论是否存在血清,Y-27632均能够抑制SRF的表达;vimentin在无血清+Y-27632组表达高于其他各组.结论:Y-27632能够诱导ADSCs向神经元样细胞分化并伴随神经特异标记物的表达.

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