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  • 一株抗人BLys单克隆抗体的制备及其生物学功能研究

    作者:徐海燕;马泓冰;徐颖;刘琳;於葛华;胡玉敏;邱玉华;张学光

    研究以稳定高表达BLys的基因转染细胞L-BLys为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,L-BLys细胞和天然表达BLys的HL60细胞为抗体筛选阳性细胞株,经免疫荧光标记分析反复筛选和以有限稀释法反复克隆化培养.将获得的克隆4F7培养细胞注射入经致敏的小鼠体内,抽取的腹水经Protein G亲和层析柱纯化.将纯化所得的抗体作用于经BLys分子刺激的扁桃体B细胞,3H-TdR检测细胞的增殖效率.结果获得1株持续、稳定分泌鼠抗人BLys单克隆抗体的杂交瘤细胞株.该细胞株所分泌的抗体能阻断膜型和可溶性BLys分子对扁桃体B细胞的促增殖作用.对这株单克隆抗体生物学功能的研究表明,这株单抗能特异性识别人BLys分子及阻断膜型和可溶性BLys发挥生物学活性.

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