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磷酸化对组蛋白免疫原性的影响
为了研究细胞活化后组蛋白磷酸化程度的改变以及对其免疫原性的影响.将正常淋巴细胞组蛋白人为加磷酸、活性组蛋白人为去磷酸,用Western blot法检测其磷酸化程度;然后用以上不同组蛋白同系免疫BALB/c小鼠,用ELISA法测定IgG类抗组蛋白抗体、抗dsDNA抗体,用免疫荧光法检测抗核抗体核型及肾脏病理,用免疫印迹法测定可溶性核抗原抗体.结果发现淋巴细胞活化后,其组蛋白H1成分发生明显的丝氨酸磷酸化,对正常组蛋白人为加磷酸仍无免疫原性,活性组蛋白人为去磷酸后仅影响抗体产生的滴度,仍具有免疫原性.所以丝氨酸磷酸化在组蛋白的免疫原性改变方面起一定的作用,但不是主要因素.
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组蛋白诱导抗核抗体产生及其对肾脏损害
目的寻找系统性红斑狼疮中诱导抗核抗体(ANA)生成的真正的自身核成分免疫原.方法从ConA活化的脾淋巴细胞中提取组蛋白免疫同系BALB/c小鼠,ELISA方法测定IgG类抗组蛋白、抗dsDNA抗体,免疫荧光法检测抗核抗体核型和免疫复合物在肾小球内的沉积,免疫印迹法测定抗可溶性核抗原抗体,考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量,光镜下观察肾脏形态变化,电镜下观察肾小球电子致密物.结果活性组蛋白诱导IgG类抗组蛋白、抗dsDNA等多种抗核抗体生成,且诱发同系小鼠产生SLE样肾脏病理变化.结论活性组蛋白是诱发抗核抗体生成、造成肾损害的免疫原之一.[全文刊登于中华微生物学和免疫学杂志2001,21(1):62]