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G群链球菌的分子鉴定及耐药特征分析
目的 探讨16S rDNA测序法鉴定β-溶血性G群链球菌的价值,通过体外药物敏感性试验确定G群链球菌对青霉素、红霉素和克林霉素等抗菌药物的耐药性,并确定红霉素耐药菌株的耐药表型及基因型.方法 采用API 20 Strep链球菌鉴定系统、兰氏抗原血清分型和16S rDNA测序法对复旦大学附属华山医院临床分离的50株β-溶血性G群链球菌进行鉴定.采用琼脂稀释法对该50株G群链球菌进行体外药物敏感性试验,并通过纸片法D试验测定红霉素耐药菌株的耐药表型.通过聚合酶链反应(PCR)检测其大环内酯类耐药基因ermB和mefA.结果 50株链球菌经手工API 20 Strep链球菌鉴定系统鉴定,均为停乳链球菌.16S rDNA PCR扩增及测序,42株为停乳链球菌,8株为咽峡炎链球菌,鉴定概率＞97％.以测序结果为标准,API 20 Strep链球菌鉴定系统鉴定的准确率为84％.兰氏抗原血清分型均为G群.药物敏感性试验结果显示,50株G群链球菌中没有对左氧氟沙星、头孢曲松、万古霉素和青霉素耐药的菌株.红霉素耐药菌株共28株(56％),其中cMLs型耐药菌株26株(52％),Ms型耐药菌株2株(4％),没有发现iMLs型耐药菌株,红霉素中介菌株4株(8％).克林霉素耐药菌株共31株(62％),其中红霉素敏感而克林霉素耐药菌株3株(6％),红霉素中介而克林霉素耐药菌株2株(4％).cMLs型耐药菌株中均检测到ermB基因,2株Ms型耐药由mefA基因介导,4株红霉素中介菌株中检出ermB和mefA基因各1株.结论 16S rDNA测序法能准确鉴定G群链球菌.G群链球菌对红霉素和克林霉素的耐药率有所提高,但对青霉素敏感,β-内酰胺类药物可以作为治疗G群链球菌感染的首选药物.
