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MALDI SepsityperTM Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术直接鉴定阳性血培养病原菌的应用评估
目的 比较MALDI SepsityperTM Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术直接鉴定血培养阳性病原菌的有效性.方法 收集上海交通大学医学院附属仁济医院2016年4-6月血培养仪报警的非重复血培养瓶138个,以传统培养鉴定的方法为金标准,同时采用以上两种前处理方法处理阳性标本,再进行MALDI-TOF MS鉴定.结果 本次共收集非重复的血培养阳性标本138份,排除6个假阳性血瓶,鉴定出的病原菌包括革兰阴性菌70株(53.03％)、革兰阳性菌57株(43.1 8％)、真菌3株和2例复数菌.MALDI SepsityperTMKit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法的血培养快速鉴定病原菌准确率分别为91.67％和84.09％,种鉴定准确率分别为83.33％和61.36％.两种前处理方法处理后,革兰阴性菌的准确率分别为98.57％和95.71％,革兰阳性菌的准确率分别为87.72％和78.59％,两者鉴定所需时间为40 min/样本和25min/样本.结论 虽然MALDI SepsityperTMKit比血清分离胶促凝管法鉴定准确率稍高但两者差异无统计学意义(91.67％对84.09％,P＞0.05),与MALDI SepsityperTM Kit相比,血清分离胶促凝管法是一种快速、易获得、低廉的MALDI-TOFMS直接鉴定血培养病原菌的前处理方法.
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应用MSK试剂盒-质谱法直接鉴定阳性血培养标本
目的 评估应用MALDI SepsityperTM Kit与MicroflexTM LT型基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(MSK试剂盒-质谱法)直接鉴定阳性血培养标本中微生物的可行性与临床价值.方法 2014年3-8月,应用MSK试剂盒-质谱法和传统血培养鉴定法对上海交通大学医学院附属新华医院临床阳性血培养标本中微生物进行鉴定.若两者鉴定结果不符,则用基因测序法予以确认.结果 491例阳性血培养标本中,462例为单种菌,29例为复数菌,共包括30个属和64个种.应用MSK试剂盒-质谱法直接鉴定血培养标本中单种菌的种、属水平符合率分别为72.5％(335/462)、76.0％ (351/462).其中革兰阴性菌的种、属水平符合率分别为75.4％(132/175)、77.7％ (136/175);革兰阳性菌的种、属水平符合率分别为70.9％ (178/251)、74.9％(188/251);念珠菌的种、属水平符合率均为75.0％ (27/36).复数菌血培养标本中鉴定出1种、2种细菌的种水平符合率分别为55.2％(16/29)、20.7％(6/29).应用MSK试剂盒-质谱法直接鉴定血流感染中临床常见菌的属水平符合率达74.2％～96.9％,鉴定时间仅需40 min/样本.结论 应用MSK试剂盒-质谱法能准确和快速地鉴定血流感染常见菌,从而缩短血流感染诊断时间,为临床上快速、合理选用抗生素提供依据.
