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G1和G2期细胞对X射线引起双链DNA断裂修复的影响
目的:探讨X射线对G1和G2期细胞双链DNA断裂损伤修复的动力学影响.方法:采用3%多聚甲醛或70%乙醇固定受X射线放射细胞的M059J、M059K和Hela,用流式细胞仪分选G1和G2期Hela细胞,以脉冲场电泳分析双链DNA断裂修复动力学.结果:乙醇固定不影响X射线放射引起的双链DNA断裂修复动力学,可用于固定Hela细胞G1和G2期的分选,且G2期细胞双链DNA断裂修复速率显著慢于G1期细胞.结论:G1和G2期细胞中的双链DNA断裂可能采用不同的修复方式.G1期细胞主要采用快速的末端连接修复方式,而G2期细胞主要采用相对较慢的同源性重组修复方式.
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癌基因诱发的DNA损伤反应与肿瘤生成
肿瘤的发生与癌基因的激活或抑癌基因的失活有着密不可分的关系.癌基因的活化及抑癌基因的抑制可引发细胞内染色体基因组的复制应激反应.持续的复制应激反应可导致双链DNA断裂或单链DNA复制中间体的产生,从而分别激活两个重要的DNA损伤反应(DDR)通路,即ATM和ATR通路.与此同时,DDR检查点在感知DNA损伤信号后,可诱发细胞周期阻滞.只有损伤的DNA在得以正确修复以后,细胞周期才能再次启动.在细胞发生肿瘤转化的情况下,癌基因在引发DNA损伤的同时,常通过多种途径抑制DDR反应,导致染色体异常的重组与分离,进而促进肿瘤的生成;而癌基因造成的持续的损伤反应,未通过DDR检验点,还可引发细胞的另外一种结局,即终细胞的老化死亡.