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  • 旋毛虫p49基因的克隆、序列分析及表达

    作者:温艳;劳为德;高虹;张传生;刘思国;甘绍伯

    目的获得旋毛虫排泄分泌抗原(excretory antigen,ES)p49基因的克隆、测序及表达.方法通过RT-PCR,从旋毛虫幼虫总RNA中扩增得到特异片段,利用TA克隆将PCR产物克隆入pUC-T载体中并进行测序及同源性比较,并定向克隆到表达载体pEG-4T-3中,转化感受态细胞,诱导表达.结果RT-PCR扩增得到p49基因,其核苷酸序列与已发表的p49基因序列一致;BLAST分析表明其与旋毛虫p49基因、43 kDa分泌性糖蛋白同源性均为99%.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,重组蛋白诱导表达在67 kDa处有一新蛋白带.结论提取旋毛虫幼虫总RNA,用RT-PCR方法克隆并表达了p49基因.

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