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口服丙型肝炎复合多表位DNA减毒鼠伤寒沙门活菌苗的实验研究
目的 利用减毒鼠伤寒沙门菌作为载体,探讨丙型肝炎病毒(HCV)口服DNA疫苗的可行性.方法 把HCV复合多表位抗原基因PCX克隆到真核表达载体pcDNA3(CMV启动子),构建HCV真核表达载体pcDNA3/PCX,转化减毒鼠伤寒沙门菌SL3261,获得HCV重组口服DNA活菌苗SL3261(pcDNA3/PCX),免疫小鼠及家兔后,检测特异性免疫应答及安全性.结果 SL3261(peDNA3/PCX)在小鼠及家兔中均可诱发低水平的特异性体液免疫及细胞免疫应答,免疫动物未见明显的毒性反应.结论 HCV口服减毒鼠伤寒沙门菌DNA疫苗可诱发特异性的免疫应答,为HCV疫苗的研究提供新的理论及实验依据.
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利用减毒沙门菌递送的柯萨奇病毒A16型VP1基因重组质粒的构建和鉴定
目的:构建能够稳定携带柯萨奇病毒A16型(CoxA16)VP1基因的重组减毒伤寒沙门菌并鉴定目的抗原的表达,研发利用减毒沙门菌递送的口服疫苗.方法:利用DNA重组技术,构建表达CoxA16 VP1蛋白的真核表达质粒,体外转染Vero细胞后检测VP1蛋白表达情况及抗原活性,并将该质粒通过电转化构建重组减毒伤寒沙门菌.结果:构建了表达CoxA16 VP1蛋白的重组质粒,转染vero细胞后检测到CoxA16 VP1蛋白的表达并具有抗原活性;获得能稳定携带该质粒的重组减毒伤寒沙门菌.结论:成功构建稳定携带柯萨奇病毒A16型(CoxA16)VP1基因的重组减毒伤寒沙门菌,为口服CoxA16疫苗的研究打下了基础.