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悬滴培养法维持瘢痕疙瘩成纤维细胞表面标志CD105的表达及其功能
目的:探讨悬滴培养法对维持体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞表面标志的作用,并初步研究CD105调节细胞功能的作用。方法以耳部瘢痕疙瘩标本3例培养成纤维细胞,将第5代细胞分别常规贴壁培养和悬滴培养1周,对同一患者来源常规培养的第4代(P4)、第5代(P5)以及悬滴培养的第5代细胞(P5HD),采用多色流式细胞仪检测表面标志CD105、CD90、CD73和CD44的表达;并采用Real-time PCR的方法,检测上述表面标志,以及瘢痕疙瘩成纤维细胞相关功能基因CTGF、Col IA1和Col IA2的mRNA表达。结果流式检测显示CD105+和CD73+CD90+CD105+细胞比例在P4和P5HD 组均高于P5组,统计学分析显示有显著性差异,但P4和P5HD组之间无差异;而CD73+、CD90+和CD44+各组细胞比例无差异。 Real-time PCR结果显示,各组细胞CD105的mRNA表达与流式结果一致;且各组CTGF和Col IA1表达差异与CD105一致。结论悬滴培养法有助于维持体外瘢痕疙瘩成纤维细胞CD105,及其与纤维化和胶原合成相应功能基因的表达,从而保持细胞的生物学功能,但机制有待于进一步的研究。
关键词: 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 悬滴培养法 白细胞分化抗原105