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颅缝早闭症相关实验荧光定量PCR内参基因的选择研究
目的 探讨用于颅缝早闭症相关实验的荧光定量PCR的佳内参基因.方法 应用与颅骨成骨、颅缝闭合相关的3组实验标本,分别为:Fgfr2cC342y/+Crouzon综合征小鼠颅缝组织、颅缝早闭患者体外培养颅缝原代细胞和体外培养的小鼠Kusa 4b 10成骨细胞株.以常用的候选管家基因作为研究对象,利用 geNorm软件对RT -qPCR结果进行比较分析,以筛选出在不同组织细胞中表达为稳定的管家基因作为内参.结果 Fgfr2C342Y/+c小鼠颅缝组织,Cyc1-Gapdh- Canx为佳组合;颅缝早闭症患者体外培养颅缝原代细胞,18S rRNA和ATP5B为佳组合;体外培养的小鼠Kusa 4b10成骨细胞株,18S rRNA和Canx为佳组合.选择不同内参基因对目的基因RT-qPCR的结果影响显著.结论 在设计RT-qPCR实验之前,应针对所选择的标本类型与种类进行管家基因稳定性分析,以增加结果的可信度.
关键词： 颅缝早闭症 荧光定量聚合酶链反应 geNorm分析
