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人胃癌原代细胞短期培养与纯化培养体外药敏试验
目的:评价人胃癌原代细胞短期培养(混杂非肿瘤细胞)与纯化培养MTT法体外药敏试验的可行性、各自的优势与缺陷.方法:采用短期培养MTT比色法测定7种化疗药物敏感性.另经反复贴壁、胶原酶消化排除、胰蛋白酶消化选择或自然纯化法获得纯的原代肿瘤细胞,再行MTT法.测定两种方法细胞数与A(光密度)值的相关性、药物抑制率及两种方法药敏结果的灵敏性.结果:短期法MTT药敏试验成功率81.4%(48/59);纯化培养为50.8%(30/59);两种方法细胞数与A值均呈直线相关(P均＜0.01),药敏结果具有可比性;两种方法7种药物敏感性顺序一致,但纯化法显示7种化疗药物的抑制率有6种均高于短期法,表明纯化法较敏感;纯化培养所需时间平均(20.2±9.5)天.结论:人胃癌原代细胞短期培养MTT比色法快捷、简便,能够反映化疗药敏结果的基本趋势及个体化差异,但灵敏性略低.纯化培养后药敏试验结果更理想,但成功率不高.
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以K562细胞为靶点的抗肿瘤药物筛选模型的建立
目的：建立以白血病细胞系K562为靶点的高通量抗肿瘤药物筛选模型.方法：在96孔细胞培养板上，运用四唑氮化合物(MTS)和电子耦联剂(PMS)连用的方法，对K562细胞增殖情况进行检测.对在化合物影响下K562细胞增殖变化的检测条件进行了优化.结果：采用这一细胞水平的高通量抗肿瘤药物筛选模型，完成了800个小分子有机化合物的筛选，每个化合物的用量是500 ng.11个化合物在浓度为5 mg/L时可抑制细胞增殖达80％以上，其中9个通过多浓度复筛得到了确认.抑制活性强的化合物的IC50为170 nmol/L，共有7个化合物显示IC50低于10μmol/L.结论：采用K562细胞系进行高通量筛选是快速、经济、有效、实用的发现新型抗肿瘤药物的方法.
