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OPN基因RNAi对U87胶质瘤细胞生长和侵袭的抑制作用
i能有效抑制U87细胞中OPN蛋白的表达(P＜0.05),OPN-RNAi同时还能下调MMP2、MMP9蛋白的表达(P＜0.05)及其酶活性(P＜0.01),并抑制U87细胞的增殖(P＜0.05)和侵袭力(P＜0.05).结论:OPN-RNAi能够有效抑制U87胶质瘤细胞的生长及其侵袭力,其机制与其抑制OPN下游基因MMP2、MMP9的表达和酶活性有关.
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过表达miR-134b抑制CD133+U87胶质瘤干细胞增殖及侵袭
目的 探讨微小RNA-134b (miR-134b)在胶质瘤干细胞(GSC)中的作用及相关机制.方法 实时定量PCR检测U87胶质瘤细胞系分离出的CD133+ GSC和CD133 GSC中miR-134b的表达量;包装慢病毒,构建过表达miR-134b的GSC,实时定量PCR检测其miR-134b、CD133、神经干细胞蛋白(nesfin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9和MMP-12 mRNA表达水平;Western blot法检测过表达miR-134b的GSC中Notch2、MMP-2、MMP-9和MMP-12蛋白表达;TranswellTM侵袭实验检测过表达miR-134b对GSC侵袭能力的影响;建立U87细胞裸鼠成瘤模型,皮下注射过表达miR-134b(实验组)及空载体(对照组)的CD133+ GSC,定期测量肿瘤大小,70 d后处死裸鼠,测定肿瘤质量,以探讨过表达miR-134b对在体肿瘤生长的影响.结果 实时定量PCR检测结果表明,与CD133-GSC相比,CD133+ GSC中miR-134b表达显著下调;通过慢病毒包装的方法成功构建过表达miR-134b的GSC,其miR-134b的表达显著高于空载体对照细胞,而MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达无显著变化,而MMP-12的mRNA及蛋白表达均显著下降;TranswellTM侵袭实验结果表明,与对照组相比,过表达miR-134b抑制CD133+ GSC的侵袭能力;实验组裸鼠体内肿瘤体积显著低于对照组,与对照组相比,过表达miR-134b的实验组肿瘤质量也降低了42％.结论 过表达miR-134b抑制CD133+ GSC的生长和侵袭.
