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脑胶质瘤相关癌基因1对人胰腺癌PANC-1细胞增殖的影响
目的:探讨脑胶质瘤相关癌基因1(glioma-associated oncogene 1,GLIl)对人胰腺癌PANC-1细胞增殖的影响.方法:构建靶向GLIl基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒重组载体pLVTHM-GLI1-shRNA(以空载体pLVTHM-GFP为对照),经包装后感染胰腺癌PANC-1细胞,应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞中GUI1、bcl-2、bcl-xl和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA和蛋白的表达;CCK8(cell counting kit-8)法分析各组细胞的生长情况.结果:成功构建了稳定低表达GUI1的GLI1-shRNA-PANC-1细胞,与PANC-1细胞和GFP-PANC-1细胞比较,GLIl-shRNA-PANC-1细胞中GLIl mRNA和蛋白表达水平分别下调了(82.1±3.2)%和(76.7±2.2)%(P<0.01),bcl-2 mRNA和蛋白表达分别下调了(49.7±5.4)%、(43.5±9.4)%(P<0.01);而blc-xl和PCNA mRNA和蛋白表达水平无明显变化.GLI1-shRNA-PANC-1细胞的增殖抑制率明显高于GFP-PANC-1、PANC-1细胞(P<0.05).结论:干扰GLI1基因的表达可抑制人胰腺癌PANC-1细胞的增殖,其机制可能与下调bcl-2的表达有关.
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Hedgehog信号通路转录因子Gli1蛋白在结直肠癌组织中的表达
目的 探讨Hedgehog信号通路转录因子脑胶质瘤相关癌基因l(gli1)蛋白在结直肠癌组织中的表达及作用.方法 免疫组化法检测Gli1蛋白在147例手术切除结直肠癌组织中的表达;Western blotting法检测Glil蛋白在19例结直肠癌新鲜组织和2个结肠癌细胞系中的表达;同时用共聚焦激光显微镜观察Gli1转录水平的抑制剂GANT61对8例直肠癌组织中直接分离的肿瘤细胞的影响.结果 147例结直肠癌根治切除标本中,Gli1蛋白在78.2％(115/147)的结直肠癌组织中表达升高,阳性信号表达在肿瘤细胞的细胞核和细胞浆.Gli1蛋白在结直肠癌组织中的表达与结直肠癌浸润前缘肿瘤细胞团数目、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关(P＜0.05).在5例Glil蛋白阳性的结直肠癌组织中,间质细胞,包括肿瘤相关纤维母细胞和内皮细胞内高表达Gli1蛋白.Gli1蛋白在结直肠癌组织和2个结肠癌细胞系中的表达也升高.对结直肠癌组织中直接分离出的肿瘤细胞,培养以后加入GANT61,可以明显抑制肿瘤细胞内Gli1蛋白的表达,而对肿瘤相关纤维母细胞没有显著影响.结论 Gli1蛋白的活化可能增强肿瘤细胞的侵袭和转移能力,从而促进结直肠癌的进展;GANT61可能为进展期结直肠癌的治疗提供新的契机.
关键词： Hedgehog信号通路 脑胶质瘤相关癌基因1 结直肠癌 免疫组织化学 -
信号传导及转录活化因子3和脑胶质瘤相关癌基因1在大肠癌组织中表达及其临床意义
目的 探讨信号传导及转录活化因子3(STAT3)和脑胶质瘤相关癌基因1(Gli1)在大肠癌组织中的表达水平及临床意义.方法 原发性大肠癌患者69例,采用免疫组织化学法检测STAT3和Gli1在大肠癌组织及相应癌旁组织中的表达水平,分析STAT3和Gli1的表达水平与大肠癌临床病理学之间的关系.结果 STAT3在大肠癌组织中表达率明显高于癌旁组织(60.87％比11.59％,P＜0.01),Gli1在大肠癌组织中表达率明显高于癌旁组织(75.36％比37.68％,P＜0.01);STAT3表达水平与大肠癌组织学分级、浸润深度、TNM分期和淋巴结转移明显相关(P＜0.05),Gli1表达水平与大肠癌组织学分级、TNM分期、淋巴结转移明显相关(P＜0.05).结论 联合检测STAT3和Gli1有助于评价大肠癌的恶性程度,判断其转移潜能.
关键词： 信号传导及转录活化因子3 脑胶质瘤相关癌基因1 大肠癌
