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人食管鳞状细胞癌中微RNA-1250及其宿主基因AATK的表达及甲基化状态分析
目的:探讨微RNA-1250(microRNA-1250,miR-1250)及其宿主基因细胞凋亡关联酪氨酸激酶(apoptosis-associated tyrosine kinase,AA TK)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发生和发展中的作用.方法:分别采用实时荧光定量PCR法和甲基化特异性PCR法检测AATK基因在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况和甲基化状态,同时采用实时荧光定量PCR法检测miR-1250在ESCC组织及其相应癌旁正常组织中的表达情况.然后,分析miR-1250表达和AATK基因表达及其甲基化状态分别与ESCC组织病理学特征的关系,以及三者之间的相关性.结果:5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)处理后,4株食管癌细胞系中AATK基因表达水平明显升高(P值均＜0.05),并且其甲基化程度明显降低.在ESCC组织中,AATK mRNA平均表达量低于癌旁正常组织(P＜0.05),AATK基因甲基化率明显高于癌旁正常组织(P＜0.05);AATK mRNA相对表达量和AATK基因甲基化率均与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期密切相关(P值均＜0.05),而与患者年龄和性别无关(P值均＞ 0.05).同时,ESCC组织中miR-1250相对表达量明显低于癌旁正常组织(P＜0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期密切相关(P值均＜0.05),而与患者年龄和性别无关(P值均＞0.05).ESCC组织中miR-1250与AATK mRNA表达明显相关(P＜0.05),而且miR-1250和AATK mRNA表达与AATK基因甲基化状态也均明显相关(P值均＜ 0.05).结论:ESCC的发生和发展可能与miR-1250和AATK低表达以及AATK基因高甲基化状态有关,而且miR-1250与AATK mRNA表达具有一致性.
关键词： 食管肿瘤 DNA甲基化 基因表达 细胞凋亡关联酪氨酸激酶 微RNA-1250
