首页 > 文献资料
-
包埋前ABC法和纳米金-银加强法双重标记技术在免疫电镜中的应用
应用包埋前ABC法和纳米金-银加强法免疫双重标记技术,电镜观察GABA能抑制性突触传递与呼吸节律产生中枢pre-Botzinger复合体神经激肽1受体(neurokinin 1 receptor,NK1 R)免疫反应神经元的关系,目的在于介绍一种简单、实用的包埋前免疫电镜双重标记技术,及其在神经生物学领域的应用.高电子密度的DAB免疫反应产物标记谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)免疫反应神经末梢,免疫金颗粒主要标记preBotzinger复合体NK1R免疫反应神经元胞体或树突的膜表面,有时胞质内也可见到免疫金颗粒标记.GAD免疫反应神经末梢与NKI R免疫反应神经元胞体或树突形成典型的对称性突触.这种包埋前免疫电镜双重标记技术具有以下优点:1.包埋前实现免疫组化双重标记有利于组织抗原性的保存.2.有利于抗体的组织内渗透.3.免疫金颗粒抗原定位精确,并可用于定量分析.
关键词： 纳米金-银加强法 ABC法 免疫电镜 pre-Botzinger复合体 -
纳米金-银加强法对骨髓微环境中Nkx2-5+细胞定位的实验研究
目的应用包埋前纳米金-银加强法,电镜观察骨髓微环境中Nkx2-5+细胞并进行形态学分析.方法取BALB/c小鼠双后肢胫骨,脱钙后行冰冻切片,利用1.4 nm超微纳金颗粒标记骨髓纵切面Nkx2-5+的细胞,通过银加强使金颗粒增大,Epon 812树脂包埋,常规超薄切片,电镜下观察.结果免疫金颗粒主要标记Nkx2-5+细胞的胞质,极少数胞核也可见到免疫金颗粒.免疫金颗粒标记细胞均为体积较大的骨髓单核细胞,偶见双核细胞.结论包埋前纳米金-银加强法除可应用于神经系统的研究外,也可应用于骨髓微环境中抗原的精确定位.
-
大鼠脑室管膜下区包埋前免疫电镜双标技术的探索
目的 观察脑室管膜下区(SVZ)神经干细胞上N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位1(NR1)的超微分布.方法 成年大鼠灌注固定,冠状面振动切片,片厚150 μm.取含SVZ区域的脑片,行巢蛋白(nestin)和NR1双标免疫组织化学染色.其中,巢蛋白为辣根过氧化物酶标记,NR1为免疫金银法标记.取1.5mm×1.0mm大小的SVZ双标阳性组织,常规电镜制样、观察、拍照.结果 电镜下观察到标记NR1的纳米金-银标颗粒电子密度高,呈颗粒状,分布于细胞膜上,偶见于胞质中；巢蛋白免疫阳性产物呈絮状,分布于胞质中.结论 包埋前免疫电镜双重标记技术对组织的抗原性保存较好,免疫金颗粒对抗原定位较精确,有利于研究两种递质在同一个细胞或终末内的共存或分析递质与其相应受体之间的联系,特别是对于中枢神经系统的研究有独到之处.
关键词： 纳米金-银加强法 免疫电镜 神经干细胞 N-甲基-D-天冬氨酸受体
