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  • 抑制NFBD1表达对喉癌放化疗敏感度影响的研究

    作者:邱志利;蒋晓平;袁小东;谭嘉萌

    目的 研究抑制NFBD1基因表达后,对喉癌细胞放化疗敏感度的影响.方法 应用慢病毒感染RNA干扰(RNAi)技术稳定下调人喉癌细胞Hep-2中NFBD1基因的表达,采用实时定量聚合酶链反应(QRT-PCR)技术及Western印迹技术检测NFBD1基因mRNA和蛋白的表达,以验证RNAi的有效性.采用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,采用MTT比色法观察抑制NFBD1基因表达后对喉癌细胞放化疗后生长的影响.TUNEL检测细胞的凋亡情况.结果 QRT-PCR及Western印迹分析表明,慢病毒感染RNAi技术在mRNA及蛋白水平均能高效、特异地抑制NFBD1基因的表达;TUNEL染色结果显示,转染NFBD1 siRNA的Hep-2细胞其凋亡率显著增加.流式细胞术结果显示,转染NFBD1 siRNA的Hep-2细胞在放疗后的凋亡率及G2/M期阻滞显著增加.MTT比色结果显示,转染NFBD1 siRNA的Hep-2细胞在放化疗后的细胞存活率显著降低.结论 重组的慢病毒NFBD1 siRNA序列能有效抑制NFBD1基因的表达,从而增加喉癌细胞的放化疗敏感度.

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