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咽鼓管管旁腺腺体中表面活性蛋白-A和β防御素2的表达及意义
目的检测表面活性蛋白-A(surfactant protein A,SP-A)和β防御素2(β-defensin-2,BD2)在小鼠咽鼓管管旁腺腺体的表达和分布,初步探讨咽鼓管管旁腺腺体的分泌功能及其在中耳防御机制中的作用.方法 取SPF级昆明小鼠的咽鼓管,石蜡切片,HE染色显示管旁腺体正常位置和组成成分,采用免疫组织化学技术链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(strept-avidin oxidase,SP)法检测SP-A和BD2在小鼠咽鼓管管旁腺腺体的表达及分布.结果①咽鼓管管旁腺腺体位于咽鼓管管腔内侧壁,由浆液性、黏液性及混合性腺体组成;②SP-A和BD2在小鼠的咽鼓管管旁腺腺体中呈阳性表达.免疫阳性产物定位于浆液性腺体细胞胞浆和部分黏液性腺体细胞核周胞浆.阳性产物集中于咽部及咽口部腺体.结论咽鼓管管旁腺腺体可分泌SP-A和BD2.SP-A降低咽鼓管管腔表面张力,维持纤毛黏液系统的正常功能,BD2和SP-A清除入侵的病原体,对维持正常中耳的无菌状态起着一定的作用.咽鼓管管旁腺腺体是中耳防御体系中的机体保护屏障.(中国眼耳鼻喉科杂志,2006,6:78～80)
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表面活性蛋白-A对脂多糖诱导的人肾小管近曲上皮细胞白介素-6表达的影响
目的：探讨表面活性蛋白-A（SP-A）的表达改变对脂多糖（LPS）诱导的人肾小管近曲上皮细胞（HK-2细胞）白介素-6（IL-6）表达的影响及机制。方法培养HK-2细胞，ELISA方法检测不同浓度的LPS（0、0．1、1、2、5、10 mg／L）作用8 h及5 mg／L的LPS于不同时间（0、2、4、8、16、24 h）作用HK-2细胞后IL-6蛋白表达的变化；应用脂质体转染法将SP-A SiRNA转染入HK-2细胞，筛选稳定转染细胞株，采用5 mg／L的LPS刺激SP-A SiRNA稳定转染的HK-2细胞8 h，ELISA方法检测细胞上清中IL-6的分泌量，Western印迹检测细胞NF-κB p65蛋白的表达。结果应用1、2、5、10 mg／L的LPS刺激HK-2细胞8 h后，IL-6蛋白表达水平较0、0．1 mg／L的LPS刺激后显著升高（P＜0．05）；同时，应用5 mg／L的LPS作用HK-2细胞4、8、16、24 h后，IL-6蛋白的表达水平较5 mg／L的LPS作用0、2 h显著升高（P＜0．05）。SP-A SiRNA转染的HK-2细胞经LPS刺激后，其NF-κBP65和IL-6蛋白表达较未转染经LPS刺激细胞明显升高（P＜0．05）。结论 SP-A可能通过抑制NF-κB p65的表达进而下调LPS诱导的HK-2细胞IL-6的表达，在脓毒症急性肾损伤时发挥保护作用。
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急性中耳炎小鼠咽鼓管管旁腺体中表面活性蛋白-A的表达
目的 研究急性中耳炎期间咽鼓管管旁腺体中表面活性蛋白-A(SP-A)的表达,探讨咽鼓管管旁腺体在防止中耳感染中的作用.方法 用免疫组织化学方法结合图像分析技术检测Ⅲ型肺炎链球菌悬液中耳腔注射后的不同时段的小鼠咽鼓管管旁腺体中SP-A的表达.结果 实验组和对照组的咽鼓管管旁腺体中均有SP-A的表达,中耳感染急性期的表达较对照组呈现出时间依赖性增强(P＜0.05).结论 咽鼓管管旁腺体在中耳感染的急性期可通过增加释放SP-A清除病菌,在防止中耳感染上可能起重要作用.
