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脂质体介导端粒酶基因转染人口腔黏膜角化细胞的实验研究
目的:将端粒酶基因转染人人正常口腔黏膜角化细胞,观察人端粒酶反转录酶(hTRT)的表达情况.方法:采用脂质体LipofectAMINE 2000与转铁蛋白共同将含有hTRT基因的pEGFP-hTRT质粒转染人正常口腔黏膜角化细胞,经荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察荧光,并进行流式细胞仪检测转染效率,采用RT-PCR检测转染细胞中外源性hTRT的表达.并经G418筛选观察其稳定表达情况.结果:LipofectAMINE 2000与转铁蛋白共同将pEGFP-hTRT转染入人正常口腔黏膜角化细胞,转染率为15.34%.转染细胞表达外源性hTRT.结论:脂质体LipofectAMINE2000与转铁蛋白成功介导含有端粒酶基因的pEGFP-hTRT质粒转染人口腔黏膜角化细胞.
关键词: 端粒酶 脂质体 口腔黏膜角化细胞 pEGFP-hTRT质粒 基因转染 -
人口腔黏膜上皮异常增生细胞形态学观察
目的:了解体外培养的人口腔黏膜异常增生细胞(Dysplastic Oral Keratinocyte, DOK)的形态学特征,为进一步采用该细胞研究口腔癌前病变提供实验资料.方法:采用相差显微镜和电镜观察DOK细胞,并与正常角化细胞(Oral Keratinocytes, OKC)以及鳞癌Tca8113细胞比较.结果:DOK和OKC在光镜下无明显区别,但与Tca8113显著不同,电镜下可见DOK细胞间桥粒明显减少.结论:DOK有别于正常细胞与癌细胞,是介于两者之间的过渡细胞.
关键词: 癌前病变 口腔黏膜角化细胞 口腔上皮异常增生细胞 -
人口腔异常增生上皮、正常上皮及鳞癌细胞生物学特性比较
目的:检测体外培养的人口腔黏膜上皮异常增生细胞( Dysplastic Oral Keritinocyte, DOK),为口腔癌前病变体外细胞模型建立提供试验依据.方法:采用细胞计数,生长曲线,克隆形成率,染色体倍性检测等方法,比较DOK与正常口腔黏膜上皮角化细胞(Oral Keritinocytes, OKC)及Tca8113(舌鳞癌细胞)细胞体外培养的生物学特性.结果:DOK在生长速度,克隆形成率,染色体异倍体率均介于正常细胞与肿瘤细胞之间.结论:DOK细胞属正常细胞向癌转变的中间过渡型细胞,可作为研究口腔癌前病变的细胞模型.
关键词: 口腔黏膜上皮异常增生细胞 口腔黏膜角化细胞 癌前病变