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  • 大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内Cdk5/p39的表达与活性

    作者:马勇全;才晓慧;李伟;黄晓山

    目的:探讨周期依赖性蛋白激酶5(Cdk5)2种激活剂p35和p39在出生后各发育阶段大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内的表达变化.方法:采用Western印迹分析、免疫沉降和Cdk5活性分析,检测出生后各发育阶段大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内Cdk5的活性变化和Cdk5、p39的表达水平.采用SPSS11.0软件包中的两两比较和扩展t检验进行统计学分析.结果:在新生大鼠三叉神经脊束尾侧亚核组织中,p39表达较低;出生后2~3周时,p39的表达高;到成体时,其表达降低到与新生大鼠三叉神经脊束尾侧亚核组织中的相同水平.在出生后各发育阶段,大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内Cdk5的表达一致,而Cdk5的活性逐渐减弱,新生大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内的Cdk5活性(115.5Kepm)比成体中的Cdk5活性(19.0 Kcpm)约高6倍,各组之间均有显著差异(P<0.01).结论:在出生后各发育阶段,大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内p39的表达与p35表达结果在时间上有差异,Cdk5/p39和Cdk5/p35在出生后各发育阶段大鼠三叉神经脊束尾侧亚核内可能扮演不同的角色.

  • 6-羟基-1-氢-吲唑保护 MPP +诱导凋亡的 SH-SY5Y 细胞的机制

    作者:梁小凤;朱雯婷;饶进军;王文雅

    目的:研究6-羟基-1-氢-吲唑对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP +)诱导凋亡的 SH-SY5Y 细胞的保护作用机制。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞 SH-SY5Y,以200μmol/ L MPP +诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡建立体外帕金森病细胞模型。 Western blot 法分别检测200μmol/ L MPP +和200μmol/ L MPP +联合0.1μmol/ L 6-羟基-1-氢-吲唑作用后 SH-SY5Y 细胞内糖原合酶激酶3β(GSK-3β)、周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)以及凋亡蛋白酶3(caspase-3)的活性。结果200μmol/ L MPP +作用 SH-SY5Y 细胞8 h, GSK-3β、CDK5与 caspase-3活性升高。200μmol/ L MPP +联合0.1μmol/ L 6-羟基-1-氢-吲唑作用 SH-SY5Y 细胞8 h,GSK-3β、CDK5与 caspase-3的活性降低。结论6-羟基-1-氢-吲唑对MPP +诱导凋亡的 SH-SY5Y 细胞的保护机制可能是抑制GSK-3β、CDK5和 caspase-3的活性。

  • 鼠脑发育过程中Cdk5激活剂-p39 mRNA的表达

    作者:才晓慧;FANG Min;李伟;JIANG Xiao-dan

    目的 探讨Cdk5的激活剂-p39mRNA在脑发育过程中的不同表达.方法 用Northern blot法和原位杂交法检测p39mRNA在大鼠脑发育过程中的表达.结果 Northern blot结果 显示,在15 d胚胎和新生大鼠脑中,p39mRNA表达较低;出生后1~3周表达显著;到成年大鼠,表达降低到与新生大鼠脑相同的水平.原位杂交法显示,p39mRNA在新生大鼠脑中所有区域神经元中表达较低;而在3周龄大鼠脑的所有区域表达高;到成年大鼠,大多数神经元中表达都降低,仅小脑还保持着高水平的表达.结论大鼠脑发育过程中,p39 mRNA在空间上和时间上有不同的表达,其亚细胞定位可能与激活Cdk5功能有关.