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  • 口腔鳞癌与正常黏膜中细胞角蛋白基因13的表达

    作者:吕晓智;陈万涛;张陈平

    目的:研究细胞角蛋白基因13(cytokeratin13,CK13)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达及意义.方法:用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常黏膜中CK13 mRNA的表达,同时用免疫组化方法检测CK13蛋白在OSCC及正常黏膜标本中的表达.所得数据采用Fisher确切概率计算法进行统计学处理.结果:RT-PCR检测结果表明,CK13 mRNA在27例OSCC中的表达较其对照黏膜表达下调,平均下调4.2倍;免疫组化染色结果显示,CK13蛋白在正常口腔黏膜与肿瘤组织之间、高分化OSCC与中、低分化OSCC之间的表达差异具有统计学意义(P<0.05).结论:在OSCC的发生、发展中,CK13基因的转录和表达水平发生明显变化,可能存在转录后水平的表达调控.CK13在OSCC分类诊断中有应用价值.

  • CK13基因5′旁侧的初步功能分析

    作者:林功标;肖健云;邱元正;王承龙;田勇泉;赵素萍

    目的探讨细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CK13)基因表达调控的机理,研究CK13基因5′旁侧不同基序对其转录活性的影响. 方法采用分子克隆结合报告基因分析的方法,构建CK13基因5′旁侧513 bp内不同基序与氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)报告基因增强子载体pCAT的重组体,通过脂质体介导的转染技术导入HeLa细胞,检测各报告基因载体CAT的相对活性. 结果 CK13基因5′旁侧起始密码子ATG上游-nt.325~-nt.207间119 bp中具有某种抑制子元件,-nt.206~-nt.94间113 bp中具有某种增强子元件. 结论 CK13基因5′旁侧513 bp内存在促进及抑制CK13基因表达的反应元件,进一步定位这些顺式反应元件并研究与之相互作用的反式作用因子,可望阐明CK13基因表达调控及组织特异性表达的详细机理.

  • AP1反应元件的确定及在细胞角蛋白13基因表达调控中的作用

    作者:林功标;肖健云;赵素萍;田勇泉;王承龙;邱元正

    目的确定细胞角蛋白13(cytokeratin 13, CK13)基因5′旁侧-nt.199~-nt.192碱基CTGAATCA反应元件的类型及其在CK13基因表达调控中的作用.方法采用报告基因分析的方法,构建CK13基因5′旁侧513 bp全片段、-nt.207~+nt.63与氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体,并采用PCR定点诱变技术,构建与-nt.207~+nt.63同样长短,但-nt.198和-nt.197的T、G分别定点诱变为A、T的氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体,通过脂质体介导的转染技术导入HeLa细胞,检测各重组体报告基因的瞬间表达,确定CK13基因5′旁侧-nt.199~-nt.192碱基CTGAATCA在CK13基因表达调控中的作用;并采用凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验验证CK13基因5′旁侧中CTGAATCA反应元件的类型.结果凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验证实CK13基因5′旁侧-nt.199~-nt.192碱基CTGAATCA反应元件是AP1反应元件,它促进CK13基因的表达.结论 CK13基因5′旁侧起始密码子上游-nt.199~-nt.192的碱基CTGAATCA是AP1反应元件,而不是cAMP反应元件,它可增进CK13基因5′旁侧的转录活性.

  • 细胞角蛋白13基因联合放疗对人鼻咽癌细胞株的作用

    作者:陈丹月;余宏;吴永寿;刘敬

    目的 观察CK13基因对人鼻咽癌HNE1细胞株放疗敏感性的影响.方法 将HNE1细胞株分为HNE1-CK13A、HNE1-CK13B、HNE1-pEGFP-N1、HNE1四组,经放疗后进行Western blotting及凋亡坏死率的检测.结果 转染了CK13基因的HNE1细胞株在放疗后比对照组的凋亡坏死率多,且随着放射剂量的增大,凋亡率也随之提高.结论 CK13基因对人鼻咽癌HNE1细胞株的放疗起协同作用,为HNE1细胞株的放射增敏剂.

  • CK13基因与鳞状细胞癌的研究进展

    作者:陈丹月

    细胞角蛋白(cytokeratin CK)是角质细胞中的主要骨架蛋白,多分布于上皮细胞,起着维持上皮组织连续性及完整性的作用.研究发现细胞角蛋白(CK)具有极高的保守性和组织分化特异性,与上皮细胞的增殖分化密切相关.目前已得到证实的细胞角蛋白有20多种,其中CK13是鳞状上皮分层和分化标记[1,2].鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)简称鳞癌,是发生在皮肤、附属器或黏膜的恶性肿瘤,主要是由上皮组织的恶变引起.CK13是构成上皮细胞的一种成分,是粘膜非角化复层鳞状上皮终末分化的标志,它的表达常伴随上皮细胞的发生、分化和形态变化,具有明显的组织特异性.因此,研究CK13的表达在上皮疾病及鳞状细胞癌的发生和诊断上具有一定意义.

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