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黄嘌呤氧化酶产生菌的产酶条件优化
通过恒化富集培养分离得到一株黄嘌呤氧化酶(XOD)产量较高的节杆菌Arthrobacter sp..采用响应面分析法优化培养基组成,XOD比活力较初始水平提高了1.9倍.利用正交试验研究摇瓶发酵条件,结果发现,当培养温度为32℃、培养基初始pH为8.0、转速为230r/min时,产酶水平又提高50%,XOD比活力达0.083u(mg蛋白)-1.在此基础上,绘制菌株产酶曲线,确定佳产酶时间为45h.
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产硫酸软骨素酶菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化
目的 从土壤中分离筛选产硫酸软骨素酶活性较高的菌株,对目标菌株进行鉴定及发酵条件优化,分析其酶解产物.方法 通过初筛及复筛筛选出1株高产硫酸软骨素酶菌株LHYM225,经形态学观察及16SrDNA序列测定并进行系统发育分析对其进行鉴定.利用单因素实验及正交实验对发酵培养基组分及发酵条件进行了优化.通过质谱法检测该酶的酶解产物.结论 16SrDNA序列分析表明菌株LHYM225与节杆菌属菌株(Arthrobacter)亲缘关系近,将其初步鉴定为节杆菌属菌株(Arthrobacter sp.),该菌株的佳发酵培养基:硫酸软骨素0.8%,KH2 PO40.02%,酵母浸粉0.6%,MgSO4·7H2O 0.8%;佳发酵条件:25℃,初始pH为6,接种量1.5%,搅拌转速150 r/min,通气培养72 h,酶活力单位达3.981 U/mL,该酶水解硫酸软骨素产生二糖和单糖.
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一种条件致病节杆菌的分离与鉴定
目的对一株分离自慢性皮肤病变的少见细菌进行鉴定.方法用表型性状、化学分类和16SrDNA测序鉴定并作药敏试验.结果为专性需氧具有杆-球循环的棒杆菌,在无机盐基础培养基上可利用单一有机化合物为碳源进行生长,其肽聚糖型为A3((Lys-Ser-Thr-Ala),其16SrDNA序列与氧化节杆菌和多色节杆菌极接近,同源性99%以上.结论此分离菌株属于节杆菌属中的氧化节杆菌群,并可能为一新种.