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阿卡波糖产生菌的诱变育种
阿卡波糖(acarbose)是α-葡萄糖苷酶抑制剂,用于口服降血糖,其生物合成主要受到易利用的结构类似物麦芽糖(maltose)的阻遏和终产物的反馈抑制.通过诱变育种可部分解除其合成途径中的阻遏和抑制作用,促进产物合成.本文采用了紫外光预处理、在种子培养基中递增添加高剂量麦芽糖的连续诱变模式,希望获得抗性突变株或解除前体生物合成途径中反馈抑制的突变株,以提高前体的生成速率,满足生物合成需要[1].结果表明,此法优于涂布平板诱变方法,所得的M-20突变株的生产能力比出发菌株提高74%.
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积累5-甲基四氢叶酸双抗突变株的选育及条件优化
目的 选育积累5-甲基四氢叶酸(5-MTHF)的双重药物抗性高产突变株,探讨发酵时间和温度对叶酸积累形式的影响.方法 紫外线和EMS联合诱变;磺胺、甲氨蝶呤药物培养基筛选菌株;单因素实验检测发酵条件对叶酸积累形式的影响;HPLC检测叶酸含量和存在形式.结果 获得稳定性良好的抗性突变株,其叶酸产量是原始菌株的2.2倍.适合5-MTHF积累的发酵时间为16 h,积累量为68.94 μg/g干菌.结论 抗性突变株能提高菌株产叶酸能力,5-MTHF含量受发酵时间影响大,而发酵温度对产物形式和产量影响不显著.
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林可霉素高产菌株的选育
目的 选育出高产稳产的林可霉素生产菌株.方法 以林可霉素产生菌L92为出发菌株,采用氯化锌、紫外线(UV)、硫酸二乙酯(DES)三重复合诱变,再经连续推理选育林可霉素、丙基脯氨酸和α,D-吡喃半乳糖抗性突变株,获得高产菌株L-96.结果 摇瓶发酵单位提高1倍,经百吨罐生产验证,平均放罐效价提高45%.结论 生产能力得到了大幅度提高,传代实验证明该突变株的高产性能遗传稳定.