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RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白对大肠癌细胞侵袭与转移的影响
目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达对大肠癌细胞侵袭与转移的影响.方法:设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体,分别稳定转染大肠癌LoVo细胞.用蛋白质印迹法筛选出一组抑制效率高的细胞进行细胞划痕实验和Transwell实验.结果:转染shRNA/324干扰载体的LoVo细胞PI3K p85α蛋白表达降低明显,抑制率达77%,选择该组细胞作为有效干扰组进行后续实验.细胞划痕实验显示,干扰组细胞的划痕愈合能力明显低于对照组细胞 (P<0.05).Transwell实验显示,干扰组细胞的穿膜细胞数明显少于对照组细胞 (P<0.05).结论:PI3K p85α蛋白表达缺失可明显降低大肠癌LoVo细胞的迁移运动能力,PI3K p85α可能成为治疗大肠癌转移的新靶点.
关键词： 结直肠肿瘤 磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位 RNA干扰 肿瘤转移 -
PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU对大肠癌细胞的促凋亡作用
探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达联合5-FU对大肠癌LoVo细胞的促凋亡作用.方法 复苏培养PI3K p85α干扰组LoVo细胞(PI3Kp85ɑ/RNAi-LoVo)和LoVo对照组细胞,Western blot鉴定干扰效果,MTT法检测5-FU对两组细胞的半数抑制浓度(IC50),Annexin-FITC标记法检测细胞凋亡.结果 Western blot结果显示LoVo干扰组细胞PI3K p85α蛋白抑制率为59%,MTT结果显示干扰组细胞5-FU的IC50值(4.57±0.16)μmol/L明显低于对照组细胞5-FU的IC50值(8.07±0.30)μmol/L (P=0.000),细胞凋亡实验显示,干扰组细胞对5-FU诱导凋亡的敏感性增加(P=0.000).结论 PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU可促进大肠癌LoVo细胞凋亡,为基因治疗和化学药物联合治疗大肠癌提供新的策略.
关键词： 大肠癌 磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位 RNA干扰 细胞凋亡 5-氟脲嘧啶 -
PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU诱导大肠癌细胞凋亡的分子机制
目的:探讨PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU对大肠癌SW480细胞促凋亡作用的机制.方法:复苏培养PI3K p85α干扰组SW480细胞(PI3Kp85ɑ/RNAi-SW480)和SW480对照组细胞,Western blot鉴定干扰效果,采用Western blot方法比较两组细胞中凋亡蛋白Bax、Bcl-6、Bim表达的差异.结果:Western blot结果显示SW480干扰组细胞PI3K p85α蛋白抑制率为84%,5-FU刺激48h后,PI3Kp85ɑ/RNAi-SW480细胞组凋亡蛋白Bax、Bcl-6、Bim的表达较SW480对照组细胞显著增加(P=0.000).结论:PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU可通过增加促凋亡蛋白的表达促进大肠癌SW480细胞凋亡,为进一步阐明大肠癌细胞恶性增值的分子机制打下基础.
关键词： 大肠癌 磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位 RNA干扰 细胞凋亡 5-氟脲嘧啶 -
RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白对大肠癌细胞增值的影响
目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达对大肠癌细胞增值的影响.方法:设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体,分别稳定转染大肠癌SW480细胞.用Western Blot筛选出一组抑制效率高的细胞进行CCK-8细胞增值实验.结果:转染shRNA/324干扰载体的SW480细胞PI3K p85 蛋白表达显著降低,抑制率约90%,选择该组细胞作为有效干扰组.CCK-8细胞增值实验显示,接种48h、72h及96h后,干扰组细胞生长速度明显低于对照组细胞 (P<0.05).结论:PI3K p85α蛋白表达缺失可降低大肠癌SW480细胞的增值速度,PI3K p85 可能是大肠癌靶向治疗的新靶点.
关键词： 大肠癌 磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位 RNA干扰 细胞增值 -
PI3K p85α在大肠癌癌变过程中的表达及意义
目的 研究磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位(PI3K p85α)在大肠癌癌变过程中,即大肠正常组织、大肠腺瘤、大肠癌中的表达及意义.方法 用免疫组织化学二步法检测试剂盒检测116例大肠病变组织标本中PI3K p85α的表达情况,用等级相关的秩和检验分析PI3K p85α在大肠病变组织中表达的意义及其与临床病理特征间的关系.结果 PI3K p85α蛋白在大肠癌癌变过程中表达阳性率呈递增趋势,差异有明显统计学意义(P<0.05).统计分析显示在大肠癌中PI3K p85α蛋白与患者的肿瘤分化程度无关,但是与临床分期相关 (P<0.05).结论 在大肠癌的发生发展过程中存在PI3K p85α蛋白的异常表达并与临床分期密切相关,PI3K/AKT信号传导通路在大肠癌癌变过程中有重要作用.
关键词： 大肠癌 磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位 免疫组织化学
